雜色鮑三個免疫相關基因的克隆及表達分析.pdf

1、雜色鮑(Haliotis diversicolor)是我國南方海域水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中重要的經(jīng)濟貝類之一,但自從上世紀90年代以來,養(yǎng)殖雜色鮑陸續(xù)暴發(fā)大規(guī)模病害,成活率急劇下降,給養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟損失,嚴重影響了雜色鮑養(yǎng)殖業(yè)的健康可持續(xù)發(fā)展。引起雜色鮑大規(guī)模死亡的原因是多方面的,最主要的是養(yǎng)殖環(huán)境惡化、雜色鮑種質(zhì)衰退以及抗病力下降。遺傳改良和培育抗病優(yōu)良品種、開發(fā)免疫增強劑等是解決目前雜色鮑養(yǎng)殖業(yè)面臨病害問題的必然選擇,而所有這些措施的基

2、礎都有賴于對雜色鮑免疫防御機制有深刻的了解。本研究對雜色鮑天然免疫系統(tǒng)中3個重要的功能基因進行克隆及表達分析,旨在為深入了解鮑免疫防御分子機制提供新資料。本研究的主要結果如下:
　　 1.克隆獲得了GABAA受體相關蛋白(GABAA receptor-associated protein,GABARAP)、表皮生長因子受體(Epidermal growth factor receptor,EGFR)和功能未預測受體(unpred

3、icted receptor,UPR)3個基因的全長cDNA,分別命名為SaGABARAP、SaEGFR和SaUPR。SaGABARAP基因cDNA全長為963bp,354bp的ORF編碼117個氨基酸,有一個自吞噬蛋白Atg8結構域。SaEGFR基因cDNA全長為2620bp,2373bp的ORF編碼790個氨基酸,有兩個EGF受體L結構域。SaUPR基因cDNA全長為1779bp,1641bp的ORF編碼546個氨基酸,有一個清道夫

4、受體半胱氨酸豐富結構域、兩個表皮生長因子結構域和一個透明帶結構域,推測可能是個膜受體。
　　 2.克隆獲得了SaGABARAP和SaUPR兩個基因的基因組DNA。SaGABARAP基因組DNA全長為4352bp,包含3個外顯子和2個內(nèi)含子。SaUPR基因組DNA全長為7517bp,包含7個外顯子和6內(nèi)含子。
　　 3.揭示了SaGABARAP、SaEGFR和SaUPR在雜色鮑各組織和胚胎幼體發(fā)育時期的表達情況。這三個基因

5、在檢測的各組織和胚胎幼體發(fā)育時期均有表達,而且都在肝胰臟中表達水平最高,SaGABARAP在原腸胚中的表達水平最高,SaEGFR和SaUPR在囊胚中的表達水平最高。所有這些暗示著這三個基因可能在雜色鮑生命過程中發(fā)揮著廣泛而重要的作用。
　　 4.揭示了雜色鮑在溶藻弧菌感染后血細胞和肝胰臟中三個基因的表達情況。弧菌感染后,SaGABARAP基因在血細胞和肝胰臟中的表達量均發(fā)生顯著提高,SaEGFR基因在血細胞和肝胰臟中的表達水平均