根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)大豆子葉節(jié)遺傳轉(zhuǎn)化的初步研究.pdf

1、大豆[Glycine max(L.) Merr.]為豆科、蝶形花亞科、大豆屬二倍體(2n=40)植物，原產(chǎn)于中國，是世界上主要的糧食和油料作物。由于大豆的品質(zhì)和產(chǎn)量易受各種病、蟲、草害的影響，常規(guī)育種又存在育種年限長、遺傳資源有限的局限，收效慢。因此人們試圖利用轉(zhuǎn)基因方法來提高大豆的產(chǎn)量、抗逆能力，改善品質(zhì)。
　　 大豆遺傳轉(zhuǎn)化研究方法中較為成熟的是農(nóng)桿菌介導(dǎo)子葉節(jié)法，但是與其他作物相比，大豆遺傳轉(zhuǎn)化存在轉(zhuǎn)化率低，重復(fù)性差等問題

2、。在影響大豆遺傳轉(zhuǎn)化的眾多因素中，受體材料的基因型對轉(zhuǎn)化效率的影響尤為重要。因此，本研究針對大豆遺傳轉(zhuǎn)化的受體材料和根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)大豆子葉節(jié)培養(yǎng)條件兩方面進(jìn)行初步研究，摸索適合轉(zhuǎn)化體系。
　　 研究以大豆品種南農(nóng)86-4，南農(nóng)99-6，南農(nóng)88-31，南農(nóng)88-1，大粒黃，猴子毛，Jack，Williams82等進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化研究。首先對遺傳轉(zhuǎn)化受體進(jìn)行研究，確定適合不同大豆品種的滅菌時(shí)間、萌發(fā)可周率及生長勢、叢生芽的再生頻率。結(jié)

3、果發(fā)現(xiàn)，Jack品種所需的滅菌時(shí)間最長，在6.5h-7h之間，猴子毛品種所需要時(shí)間相對來說最短，在4.5h-5h之間。而其他品種則多在5h-6h之間。猴子毛、88-1、Jack的可用率較高，88-31可用率最低。在本實(shí)驗(yàn)室的供試品種中，猴子毛的再生頻率最高，高達(dá)82.7％，Jack次之，南農(nóng)86-4再生頻率最低，為39.4％。
　　 本研究還對根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)大豆子葉節(jié)培養(yǎng)條件進(jìn)行了優(yōu)化，從不同篩選濃度對芽誘導(dǎo)和芽伸長的影響、及生