豬細(xì)小病毒重組偽狂犬病毒的研究.pdf

1、豬細(xì)小病毒(PPV)與偽狂犬病毒(PRV)是引起豬繁殖障礙的兩個(gè)主要病原。PPV和PRV引起的疾病在我國(guó)有很高的感染率和發(fā)病率，給我國(guó)的養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。傳統(tǒng)的常規(guī)疫苗對(duì)防制PPV和PRV的感染有一定的效果，但是存在不可避免的缺陷，為了更好的控制PPV和PRV感染，研制更加安全有效的PPV-PRV二價(jià)基因工程疫苗是解決這一問(wèn)題的最好途徑。 偽狂犬病病毒基因組為一雙鏈、線狀DNA，在長(zhǎng)約150kb的基因組上存在許多與病毒

2、復(fù)制無(wú)關(guān)的非必需基因，這些基因可供外源基因的插入，而使之成為活載體疫苗。以含PPVNADL-2株全部序列的GH質(zhì)粒為模板，擴(kuò)增了完整的PPVVP2基因和部分VP1基因，并將其連接到PGEM-TEasy載體中，構(gòu)建了重組質(zhì)粒pVP2。為了構(gòu)建豬細(xì)小病毒和偽狂犬病毒重組病毒，我們根據(jù)AnaI.Ranz等報(bào)道的PPVNADL-2株病毒基因組序列設(shè)計(jì)了一對(duì)包含其結(jié)構(gòu)蛋白VP2基因的PCR引物，以復(fù)制型DNA為模板，通過(guò)PCR擴(kuò)增出長(zhǎng)約2.114