水稻胡麻葉斑病病原菌的分離鑒定及生物學(xué)特性研究.pdf

1、水稻是重要的糧食作物，從幼苗期到收獲期，會發(fā)生多種病害，這些病害造成了水稻產(chǎn)量的重大損失。稻平臍蠕孢引起的水稻胡麻葉斑病就是其中之一。世界歷史上的印度、孟加拉曾有過水稻胡麻葉斑病大發(fā)生；我國此病以前在南北各稻區(qū)發(fā)生普遍而嚴(yán)重。本文對水稻胡麻葉斑病病原菌進行了分離、形態(tài)學(xué)鑒定及分子鑒定；研究了外界條件對菌絲生長、菌落形態(tài)及孢子萌發(fā)的影響。具體研究結(jié)果如下：
　　 1.采用常規(guī)真菌分離法，通過多次重復(fù)挑取菌落邊緣未污染的菌絲，獲得了

2、純菌株，得到了柯赫氏法則的驗證。
　　 2.通過對菌落、分生孢子梗及分生孢子的形態(tài)特征觀察，進行了形態(tài)學(xué)鑒定。分離的病原菌在PDA培養(yǎng)基上，菌絲開始階段呈白色蓬松，3d后逐漸變?yōu)楹诨疑囵B(yǎng)基背面顏色由淡黃色變?yōu)楹谏?。菌落緊貼培養(yǎng)基匍匐生長。當(dāng)生長7d時，菌落上有明顯同心輪紋，菌落表面有大量菌核生長。分生孢子梗單生，褐色，不分枝，頂端呈膝狀彎曲；分生孢子呈長橢圓形、梭形、倒棍棒狀，正直或向一方彎曲，褐色，兩端漸狹，鈍圓，種臍較平

3、，有5～10個假隔膜；形態(tài)學(xué)鑒定結(jié)果為稻平臍蠕孢。
　　 3.采用18SrDNA和ITS核酸序列同源比對的方法，進行了分子鑒定。測得的序列在NCBI中進行Blastn比對，結(jié)果表明與待鑒定的病原菌18SrDNA同源性最高的是狗牙根平臍蠕孢有性態(tài)(Cochlioboluscynodontis)，二者的相似度為99％，與其ITS序列同源性最高的是稻平臍蠕孢(Bipolarisoryzae)，二者的相似度也為99％。分子鑒定結(jié)果也為稻

4、平臍蠕孢。
　　 4.研究了培養(yǎng)基、光照、溫度、pH、碳源和氮源對菌絲生長和菌落形態(tài)的影響。結(jié)果表明：菌絲生長的最適培養(yǎng)基為玉米粉瓊膠培養(yǎng)基；最適光照為光暗交替；最適pH為9；最適溫度為25℃，致死溫度為55℃/10min；最適碳源為蔗糖；最適氮源為甘氨酸。此菌在各種培養(yǎng)基、光照、碳源及氮源上的菌落形態(tài)均有差異。
　　 5.研究了光照、溫度、pH、碳源和氮源對孢子萌發(fā)的影響。結(jié)果表明：孢子萌發(fā)的最適光照為24h全光照；最