我國棉花黃萎病菌遺傳多樣性分析.pdf

1、本研究以來自全國12個(gè)省(自治區(qū))96個(gè)縣的棉花黃萎病菌(Verticillium dahliae)為研究對(duì)象，從培養(yǎng)性狀、SSR和ISSR指紋圖譜等方面對(duì)其進(jìn)行了群體遺傳多樣性的研究，并結(jié)合致病力測定結(jié)果及地理來源進(jìn)行了全面分析。對(duì)其中部分培養(yǎng)性狀特殊的菌株進(jìn)行了生理特性和分子鑒定；選擇致病力不同的菌株，研究了生理特性與致病力的關(guān)系。為進(jìn)一步研究我國棉花黃萎病菌的遺傳變異、致病機(jī)理、棉花的抗病育種、抗性品種的合理布局、抗性喪失的原因，

2、品種與病菌的互作等提供依據(jù)。得到的主要研究結(jié)果如下：
　　 1.我國的棉花黃萎病菌在PDA培養(yǎng)基上存在5種不同的培養(yǎng)類型，B型菌株表現(xiàn)為菌核多，均勻密布，菌落邊緣有白色圓環(huán)，占72.9％；C型菌株表現(xiàn)為菌核較少，大多分布在菌落周圍，形成黑色圓環(huán)，菌落中間為白色，散生少量或極少菌核，占23.6％。長江流域菌株變異最大，其次是黃河流域，新疆棉區(qū)的變異最小。野生菌株均為雜合體，其單孢后代在培養(yǎng)性狀上也存在明顯的變異。
　　 2

3、.分離的308個(gè)野生菌株中，有14個(gè)菌株在PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)性狀特殊，對(duì)其進(jìn)行溫度反應(yīng)鑒定和特異性引物的分子檢測。結(jié)果表明，供試菌株均為大麗輪枝菌。采用落葉型特異引物D-1/D-2和非落葉性特異引物ND-1/ND-2對(duì)供試菌株進(jìn)一步檢測，結(jié)果表明供試菌株中落葉型菌株為155個(gè)，約占91.2％；非落葉型菌株為15個(gè)，其中11個(gè)新疆菌株，約占新疆菌株總數(shù)的45.8％，表明我國的棉花黃萎病菌絕大多數(shù)為落葉型棉花黃萎病菌。
　　 3.在

4、一致的生長條件下，測定了12個(gè)致病力不同菌株的生長速率、分生孢子產(chǎn)量和毒素分泌量。結(jié)果表明，不同菌株的生長速率、分生孢子產(chǎn)量及毒素分泌量存在很大的差異，而且與菌株的致病力均有一定的正相關(guān)性；菌株的生長速率和分生孢子產(chǎn)量與是否落葉不存在相關(guān)性，而菌株的毒素分泌量與是否落葉存在一定的相關(guān)性。
　　 4.依據(jù)萵苣黃萎病菌(Verticillium dahliae)全基因組序列設(shè)計(jì)SSR引物，建立并優(yōu)化SSR反應(yīng)體系，篩選出13對(duì)多態(tài)性

5、較高的引物，選擇170個(gè)代表菌株，進(jìn)行SSR指紋圖譜分析。UPGMA聚類結(jié)果顯示，170個(gè)供試菌株明顯劃分為2個(gè)群體，群體Ⅰ共包括26個(gè)菌株，其中18個(gè)為新疆菌株，約占69.2％；群體Ⅱ包括144個(gè)菌株，內(nèi)地菌株有138個(gè)，約占95.8％。分析表明菌株的親緣關(guān)系與地理來源存在一定的相關(guān)性，即新疆菌系與內(nèi)地的菌系親緣關(guān)系較遠(yuǎn)，而新疆菌株之間及內(nèi)地各省份的菌株之間的親緣關(guān)系很接近；結(jié)合菌株致病力測定的結(jié)果分析表明，SSR指紋圖譜與菌株致病力