利用SSR分子標(biāo)記選育低氰含量高丹草新品系的研究.pdf

1、為培育氫氰酸含量低、綜合農(nóng)藝性狀優(yōu)良的高丹草新品種，本研究將Z3A、V4A等高粱雄不育系與黑殼、白殼、棕殼、紅殼4種蘇丹草組配進(jìn)行人工授粉雜交，獲得了種間雜種F1代。從F2代分離群體中選出低氫氰酸含量和高氫氰酸含量的植株建立基因池，篩選出與低氫氰酸含量相關(guān)的SSR特征片段，對(duì)其進(jìn)行克隆與序列分析，將SSR標(biāo)記與系譜法相結(jié)合進(jìn)行了高丹草低氫氰酸含量?jī)?yōu)良新品系的選育研究。主要結(jié)果如下：
　　1．高粱雄不育系Z3A、V4A與4種蘇丹草雜

2、種F1植株高大，生長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng)，超親優(yōu)勢(shì)13.86％～39.42%；穗型均呈雙親中間型，分蘗能力強(qiáng)，育性高，PMC MⅠ染色體配對(duì)行為規(guī)則；鮮草莖葉氫氰酸含量為9.38～42.01mg/kg，花期主莖糖錘度值為8.89%～9.46%。
　　2.試驗(yàn)獲得與低氫氰酸含量相關(guān)的SSR特征片段TZ1、TZ2和TZ3，其序列全長(zhǎng)分別為281bp、220bp和650bp，可用于高丹草低氫氰酸含量株系選擇。經(jīng)同源性比對(duì)發(fā)現(xiàn)，片段TZ1與高粱生物活性炭

3、88M4克隆全序列同源性為95%，與香附子Cyr_350 SSR標(biāo)記的基因組序列同源性為90%；片段TZ2與高粱推測(cè)受體蛋白激酶基因組序列同源性為75%，與水稻微衛(wèi)星MRG2713基因序列同源性為88%；片段TZ3與高粱假想蛋白基因序列同源性為96%。開放閱讀框分析表明，片段TZ1含有1個(gè)126bp的假定開放閱讀框，可編碼41個(gè)氨基酸；片段TZ3含有1個(gè)294bp的假定開放閱讀框，可編碼97個(gè)氨基酸；TZ2中沒有完整的開放閱讀框。

4、>　　3．選育出的高丹草新品系SLCN01、SLCN02和SLCN08，株高387.6～414.8cm，生育期127～138d，單株分蘗數(shù)6.16～6.92個(gè)，鮮草莖葉氫氰酸含量低至6.12～7.06mg/kg，鮮草產(chǎn)量139935.03～151345.33kg/hm2，種子產(chǎn)量5662.80～5838.75kg/hm2，拔節(jié)期粗蛋白質(zhì)含量14.45%～15.68%，粗纖維含量低至24.50%左右，開花期主莖糖錘度值10.88%～12.

5、01%，賴氨酸含量0.422%～0.468%，新品系育性高，染色體遺傳穩(wěn)定。
　　4．用9對(duì)SSR適宜引物擴(kuò)增11個(gè)高丹草材料基因組DNA，得到332個(gè)SSR位點(diǎn)，多態(tài)性位點(diǎn)比率高達(dá)95.78%。每對(duì)引物擴(kuò)增的SSR指紋圖譜差異明顯，可用于11個(gè)高丹草新品系（種）的分子鑒定。以GD值0.61為基準(zhǔn)，將11份高丹草材料劃分為3類：SLCN01、SLCN02、SLCN03、SLCN09、SLCN10、蒙農(nóng)3號(hào)為一類，SLCN04、SL