硫酸鋅對(duì)纖毛蟲病療效和水生動(dòng)物的毒性作用.pdf

1、固著類纖毛蟲可寄生在動(dòng)物的鰓及體表，對(duì)魚類、甲殼類、貝類及龜鱉等動(dòng)物均有一定危害。大量寄生于鰓絲上會(huì)嚴(yán)重影響呼吸作用；大量寄生于體表上會(huì)妨礙其游泳、攝食及甲殼動(dòng)物的蛻殼等活動(dòng)，常造成大量死亡，對(duì)幼體危害甚大，而成體后大量寄生蟲會(huì)嚴(yán)重影響商品價(jià)值。硫酸鋅對(duì)固著類纖毛蟲有殺滅作用。多年來(lái)常用主要成份為硫酸鋅的商品漁藥如纖蟲凈、纖蟲殺等來(lái)防治固著類纖毛蟲病。由于硫酸鋅在防治固著類纖毛蟲中大量頻繁使用，使用濃度從0.3mg/L逐漸上升到2.8m

2、g/L。本實(shí)驗(yàn)研究的四種固著類纖毛蟲對(duì)硫酸鋅毒性的敏感性蓮蓬蟲＞累枝蟲≥聚縮蟲＞鐘蟲，藥浴4h內(nèi)開始死亡的濃度分別是1.94、4.04、4.04和7.75mg/L。24h內(nèi)大部分死亡的濃度分別是3.88、8.07、8.07和7.75mg/L，說(shuō)明在長(zhǎng)期的用藥過(guò)程中許多固著類纖毛蟲對(duì)硫酸鋅產(chǎn)生了耐藥性。目前生產(chǎn)中尚未開發(fā)出能替代硫酸鋅的高效、低毒、價(jià)廉的藥物，硫酸鋅仍在生產(chǎn)中大量使用。
　　 我國(guó)許多河流、海灣等的沉積物和水中鋅的

3、濃度有逐漸上升的趨勢(shì)，正呈污染的態(tài)勢(shì)發(fā)展。工業(yè)污染是鋅污染的主要來(lái)源，全世界每年通過(guò)河流向海洋輸送鋅高達(dá)390萬(wàn)噸。全世界鋅礦的開采量正逐漸增大，鋅的使用量也不斷增大，工業(yè)中鋅的污染形勢(shì)更加嚴(yán)峻。工業(yè)污染和農(nóng)業(yè)污染的雙重污染最終都匯聚到水環(huán)境中來(lái)，極易造成局部高濃度的鋅污染和廣大水域形成亞致死濃度的污染。機(jī)體對(duì)鋅的需求是有一定限度的，過(guò)量則可能影響生命活動(dòng)正常進(jìn)行，硫酸鋅的使用對(duì)水環(huán)境中生物的生存繁殖造成了潛在威脅。
　　 通過(guò)

4、采用急性毒性實(shí)驗(yàn)方法測(cè)得了硫酸鋅對(duì)中華絨螯蟹仔蟹(Eriocheir sinensis)、不同發(fā)育階段的克氏原鰲蝦(Procambarus clarkii)、異育銀鯽幼魚(Carassius aura tusgibel io♀×Cyprinus carpiovar. Singuonensis♂)及田螺(Cipangopaludina chinensisGray)4種常見的生活于不同水層的淡水經(jīng)濟(jì)養(yǎng)殖動(dòng)物的半致死濃度(LC50)為：中華絨

5、螯蟹仔蟹24h、48h、72h、96hLC50(Zn2+)分別為18.39mg/L，11.10mg/L，7.63mg/L，5.84mg/L;克氏原鰲蝦幼蝦分別為84.48mg/L，16.50mg/L，4.78mg/L，2.60mg/L;克氏原鰲蝦小蝦分別為947.37mg/L，455.54mg/L，296.68mg/L，226.41mg/L;克氏原螯蝦成蝦分別為2769.30mg/L，1118.21mg/L，441.94mg/L，250

6、.50mg/L;異育銀鯽幼魚分別為46.51mg/L，33.43mg/L，23.86mg/L，19.58mg/L;田螺分別為89.34mg/L，56.33mg/L，38.90mg/L，34.23mg/L。鋅中毒后4種動(dòng)物均表現(xiàn)煩躁不安，活力逐漸減弱，反應(yīng)遲鈍，最終死亡。隨水體中鋅濃度增加，4種動(dòng)物表現(xiàn)不同程度的中毒癥狀，死亡率增高；同一濃度，暴露時(shí)間越長(zhǎng)中毒癥狀越明顯，死亡率越高。另外，相對(duì)異育銀鯽幼魚和田螺，中華絨螯蟹仔蟹、克氏原螯蝦

7、幼蝦對(duì)硫酸鋅毒性較敏感，而克氏原螯蝦小蝦和成蝦耐硫酸鋅毒性能力較高。
　　 克氏原螯蝦是目前國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)極為熱銷的淡水蝦類之一，其養(yǎng)殖規(guī)模正逐年擴(kuò)大，逐漸成為研究和開發(fā)的熱點(diǎn)。硫酸鋅對(duì)克氏原螯蝦的慢性毒性損傷如何，是否會(huì)影響其免疫抗病能力及組織結(jié)構(gòu)等問(wèn)題備受養(yǎng)殖生產(chǎn)者及學(xué)者的關(guān)注。由于蝦蟹等甲殼動(dòng)物不具有特異性免疫功能，依靠非特異性免疫來(lái)抵抗外來(lái)病原的侵襲，采用測(cè)定其非特異性免疫相關(guān)酶活性的方法來(lái)評(píng)價(jià)亞致死濃度的硫酸鋅藥浴對(duì)機(jī)體免

8、疫力的影響。將克氏原螯蝦于Zn2+濃度為0.40mg/L、4.04mg/L及40.37mg/L的硫酸鋅溶液中藥浴21d，分別測(cè)定肝胰腺和鰓中4種以及血清中6種非特異性免疫因子活性，從免疫學(xué)角度探討了硫酸鋅對(duì)克氏原螯蝦的毒性影響。結(jié)果顯示：21d內(nèi)各濃度對(duì)血清凝集素均無(wú)顯著影響。血清溶血素各濃度組均表現(xiàn)出活性先逐漸升高再下降的趨勢(shì)。酚氧化酶(PO)、過(guò)氧化氫酶(CAT)、酸性磷酸酶(ACP)及溶菌酶(LSZ)在0.40mg/L濃度下各組織

9、中活性均變化不顯著，而4.04mg/L以上濃度組除肝胰腺中PO活性變化均不顯著外其它酶的活性均發(fā)生了顯著變化，且變化規(guī)律存在一定組織差異。4.04mg/L以上濃度組，PO在鰓和血清中的活性隨藥浴時(shí)間加長(zhǎng)呈增大的趨勢(shì)；CAT在肝胰腺中的活性先上升再下降再上升，鰓中始終低于對(duì)照組而血清中呈前期抑制后期升高的趨勢(shì)；ACP在肝胰腺和鰓中主要呈抑制狀態(tài)，血清中4.04mg/L組先升高再下降而40.37mg/L組均低于對(duì)照組；LSZ在肝胰腺中主要呈

10、前期抑制后期升高的趨勢(shì)，鰓中先升高后下降而血清中活性均高于對(duì)照組。以上結(jié)果表明Zn2+濃度高于4.04mg/L的硫酸鋅溶液長(zhǎng)時(shí)間藥浴對(duì)克氏原螯蝦健康構(gòu)成了脅迫，可能削弱其免疫力而增大被病原感染的幾率。
　　 組織病理學(xué)研究表明，克氏原螯蝦成蝦在Zn2+濃度為0.40mg/L、4.04mg/L及40.37mg/L的硫酸鋅溶液中藥浴21d后各組織出現(xiàn)了不同程度的病理變化。肝胰腺、觸角腺細(xì)胞及腸道內(nèi)含物中出現(xiàn)染成棕褐色的顆粒物，肝細(xì)胞

11、中顆粒的數(shù)量與硫酸鋅濃度成正相關(guān)。顆粒隨壞死肝細(xì)胞的脫落釋放到肝小管中，腸道內(nèi)含物中出現(xiàn)相同的顆粒物，說(shuō)明鋅可經(jīng)肝胰腺解毒后以顆粒的形式經(jīng)細(xì)胞脫落排入腸道釋放到體外。40.37mg/L組藥浴21d時(shí)肝胰腺出現(xiàn)肉眼可見的棕褐色顆粒狀斑點(diǎn)，是肝細(xì)胞大量壞死脫落形成，結(jié)締組織大量增生使肝胰腺固縮、硬化，影響正常的肝功能。觸角腺端囊、迷路和腎管處細(xì)胞出現(xiàn)壞死，使離子平衡、滲透壓調(diào)節(jié)及一些代謝廢物的排泄受到影響。鰓膜與呼吸上皮分離，呼吸上皮細(xì)胞壞

12、死，脫落入微血管腔，40.37mg/L組鰓絲萎縮。鰓的損傷嚴(yán)重影響氣體交換而造成缺氧，危害機(jī)體健康。精巢和卵巢組織中均有血細(xì)胞浸潤(rùn)，精巢中細(xì)胞大面積壞死，卵細(xì)胞也出現(xiàn)變性、萎縮、壞死。4.04mg/L以上濃度組長(zhǎng)期藥浴將嚴(yán)重?fù)p害生殖系統(tǒng)，影響后代繁育。以上結(jié)果說(shuō)明Zn2+濃度為4.04mg/L以上的硫酸鋅溶液長(zhǎng)期藥浴對(duì)克氏原螯蝦毒性較大，嚴(yán)重威脅克氏原螯蝦的生存繁殖，因此水環(huán)境中鋅的安全濃度應(yīng)低于4.04mg/L。
　　 克氏原

13、螯蝦對(duì)鋅有一定的富集作用。將其于Zn2+濃度為0.40mg/L、4.04mg/L及40.37mg/L的硫酸鋅溶液中藥浴21d，各濃度組的鰓、肝胰腺、甲殼和肌肉中Zn2+濃度呈上升趨勢(shì)。鰓、肝胰腺和甲殼有較強(qiáng)的鋅富集能力，是克氏原螯蝦主要的鋅富集部位，在各鋅溶液中富集系數(shù)(BCF)分別為407.78，79.46，40.80:656.90，143.58，41.39;2691.54,328.46，52.03。觸角腺、性腺、消化道和血淋巴對(duì)鋅的

14、富集效應(yīng)不明顯。觸角腺和性腺在藥浴前期Zn2+濃度不斷增大,隨后迅速下降，并始終低于對(duì)照組。消化道在藥浴過(guò)程中各濃度組均出現(xiàn)兩次Zn2+濃度峰。血淋巴中0.40和4.04mg/L組分別在第3和1d時(shí)出現(xiàn)Zn2+濃度峰，而40.37mg/L組在第2h、3d和14d出現(xiàn)三次Zn2+濃度峰，硫酸鋅濃度越大血藥濃度波動(dòng)越大。
　　 將藥浴后的蝦放入不添加鋅的清水中飼養(yǎng)63d，發(fā)現(xiàn)體內(nèi)富集的鋅有一定的釋放效應(yīng)。在清水中飼養(yǎng)3d內(nèi)鰓中Zn2

15、+濃度迅速下降，并始終維持在較低濃度，說(shuō)明鰓中的鋅很容易被釋放。肝胰腺、甲殼和消化道中Zn2+濃度逐漸下降，一段時(shí)間后又逐漸上升，濃度甚至高于富集實(shí)驗(yàn)時(shí)的最大值。肌肉和血淋巴中Zn2+濃度在清水中飼養(yǎng)約3d后隨時(shí)間的加長(zhǎng)逐漸降低。卵巢中Zn2+濃度變化不大，而精巢中隨飼養(yǎng)時(shí)間的加長(zhǎng)有逐漸增大的趨勢(shì)。蝦體內(nèi)富集的鋅有向肝胰腺、甲殼、消化道和精巢轉(zhuǎn)移的趨勢(shì)。清水中飼養(yǎng)63d時(shí)，各組織中鋅濃度逐漸恢復(fù)到接近對(duì)照組的水平。以上結(jié)果說(shuō)明克氏原螯蝦