杉木開放式組織培養(yǎng)的初步研究.pdf

1、杉木(Cunninghamia lanceolata)是我國南方最重要的速生豐產(chǎn)樹種,具有速生、豐產(chǎn)、材性好、用途廣等優(yōu)良特性,在我國人工林中具有重要的地位。植物開放式組織培養(yǎng),是指在抑菌劑的作用下,使植物組織培養(yǎng)不需要嚴(yán)格無菌操作環(huán)境,不需要高壓滅菌和超凈工作臺,在開放的有菌環(huán)境中進(jìn)行植物的組織培養(yǎng),從根本上簡化組培環(huán)節(jié),降低組培成本,達(dá)到真正的工廠化要求。本研究將開放式組織培養(yǎng)應(yīng)用到杉木上,旨在探索并建立一種“植物開放式組織培養(yǎng)”模

2、式,使杉木的開放式組織培養(yǎng)真正應(yīng)用于生產(chǎn),服務(wù)于林業(yè),為實現(xiàn)組培產(chǎn)業(yè)化開辟一條新路。本研究通過篩選適合杉木開放式組培的抑菌劑,并對在加有不同抑菌劑的培養(yǎng)基上生長杉木的組培苗的株高、鮮重、干重、生根數(shù)、根長、葉綠素?zé)晒鈪?shù)進(jìn)行測定和分析,論證開放式組培在杉木上應(yīng)用的可行性,并得到如下結(jié)論:
　　 (1)通過對杉木組培中常見的污染真菌進(jìn)行分離純化,共獲得9種真菌,其中曲霉屬(Aspergillus)2種,毛霉屬(Mucor)2種,青

3、霉屬(Penicillum)3種,木霉屬(Trichoderma)1種,根霉屬(Rhizopus)1種。從不同濃度抑菌劑抑菌效果的比較中得出,菌殺保果抑菌效果最明顯,在62.Smg／L水平上對5種真菌都有抑制作用,且效果與250mg／L相似；其次是80％的代森錳鋅對5種真菌也有一定的抑制作用,且不同濃度梯度之間的抑菌效果沒有差異。高濃度次氯酸鈉對這5種真菌均有很強的抑制作用,而低濃度(0.1％)則作用微小。多菌靈和百菌清的抑菌效果不理想

4、,對根霉與毛霉無任何作用。
　　 (2)在杉木開放式組織培養(yǎng)抑菌劑篩選方面,通過幾種混合抑菌劑對組培過程中常見菌類的抑制作用的檢測,最終得出組合9即62.5mg／L80％代森錳鋅+62.5mg／L菌殺保果+0.5％次氯酸鈉這一混合抑菌劑的抑菌效果最好,可以抑制所測出的以上幾種實驗室常見的菌類。加入組合9這一種混合抑菌劑后,在開放條件下配制用于杉木組培的培養(yǎng)基,所配制的培養(yǎng)基污染率只有3.4％,和經(jīng)過嚴(yán)格高壓后的培養(yǎng)基污染率相當(dāng),

5、而沒有加入抑菌劑的培養(yǎng)基污染率則達(dá)到了27％。
　　 (3)抑菌劑對于杉木組培苗生長的影響方面,培養(yǎng)基加入組合9這一種混合抑菌劑后,杉木組培苗的生長情況總體來說較好。通過方差分析和LSD多重比較發(fā)現(xiàn),株高,鮮重和干重都呈現(xiàn)出同樣的結(jié)果,即添加組合9的不同無性系杉木組培苗生長情況最好,和對照組的差別最小。從葉綠素?zé)晒鈩恿W(xué)參數(shù)也可以看出,組合9這一種抑菌劑對杉木葉綠素的合成和苗木光合作用的能力影響很小,和對照組的差別也是最小的。<

6、br>　　 對于影響組培杉木根的生長方面,通過方差分析和LSD多重比較可以看出,抑菌劑組合對于杉木生根數(shù)影響不大,而對于根長方面則有很大的影響。同樣表現(xiàn)出來是組合9處理條件下的不同無性系杉木組培苗根長情況最好,和對照組的差別最小。
　　 所以在杉木的開放式組培中,加入組合9這一種混合抑菌劑既能防止污染又能保證苗木生長。這一抑菌劑使杉木的開放式組培成為可能。
　　 (4)杉木開放式組培體系初步建立,在杉木開放式組培中,抑

7、菌劑對于環(huán)境和操作技術(shù)的要求也是很高的,只有嚴(yán)格按照組培體系的要求來做才能真正建立成功的杉木開放式組培體系。
　　 (5)通過對開放式組織培養(yǎng)和傳統(tǒng)組培的成本進(jìn)行分析對比,得出杉木開放式組培對比杉木傳統(tǒng)組培來說成本更低,表現(xiàn)為每株杉木組培苗的成本下降了約30％,這將大量節(jié)省杉木組培苗工廠化的生產(chǎn)成本。而且,由于沒有設(shè)備的限制,這樣組培工廠的建立將更加的簡單。同時因開放式組培沒有高壓滅菌的環(huán)節(jié),因而節(jié)省了大量的時間和人力,增加了安