河南省羊源硬蜱種類鑒定及無漿體、梨形蟲攜帶情況調(diào)查.pdf

1、硬蜱為羊群間病原傳播的重要媒介，據(jù)報道約10％的蜱類攜帶病原體，不同硬蜱種類傳播病原體種類不同，可致使多種疾病在羊群中暴發(fā)，對羊群危害極大，嚴重影響畜牧業(yè)的健康發(fā)展。因此研究清楚當?shù)亓餍杏豺绶N類及其病原攜帶情況具有重要的意義。無漿體Anaplasma和梨形蟲Piroplasm病為羊群間常見的血液原蟲病，本研究初次對河南省流行硬蜱中前述2種病原的攜帶情況進行凋查，為蜱傳病研究提供參考依據(jù)及理論基礎。
　　本試驗從2011年7月-20

2、12年9月對河南省鄭州、洛陽、南陽等20個縣市的386只羊體表寄生硬蜱進行種類鑒定，在光學顯微鏡下對其進行形態(tài)學描述，參考歷史資料初步確定硬蜱種類;利用常規(guī)PCR技術(shù)對羊源硬蜱進行基于核糖體小亞基(16S rDNA)和ITS-2兩個基因位點進行序列分析，鑒定河南省羊源硬蜱流行種類及其基因型，確定河南省羊源硬蜱和我國已報道同種類硬蜱之間的分子種系進化關系;并使用MEGA等序列分析軟件對河南省不同地區(qū)所測得硬蜱序列進行差異比對，以此來分析河

3、南省不同地區(qū)間流行硬蜱種類的血緣關系，結(jié)果發(fā)現(xiàn)采自河南省20個縣市羊體表感染蜱類均為長角血蜱H.longicornis，16S rDNA基因序列B(l)AST結(jié)果顯示均與蘭州株長角血蜱(FJ712721.1)同源性達99％，與四川(JF979373.1)、河北株(JF979374.1)長角血蜱相似性99.9％，E值均為0;ITS-2基因序列BLAST結(jié)果顯示均與河北株(JQ346683)相似性99％，E值均為0;對測序結(jié)果中26條（每個

4、地區(qū)選1-2條）16S rDNA序列進行序列差異性及同源性分析，26條序列間差異性小，僅存在少數(shù)堿基的替換或缺失。序列間同源性分析結(jié)果顯示同源性最大的數(shù)值為100％，最小數(shù)值為82.7。為蜱類系統(tǒng)研究及蜱傳病防控奠定了基礎。
　　為了解河南省硬蜱攜帶無漿體Anaplasma及梨形蟲Piroplasma病原情況，對上述DNA樣品132份，利用常規(guī)PCR和巢式PCR技術(shù)進行了檢測。對所有樣品擴增后，發(fā)現(xiàn)無漿體陽性34份，陽性率:22.

5、7％，其中A.ovis陽性3份，陽性率:2.3％、A.bovis陽性27份，陽性率:20.4％;A.phagocytophilum陽性4份，陽性率:3.0％;同時感染2份無漿體種樣品數(shù)為1份，陽性率:0.76％;Theileria luwenshuni陽性率:14.4％，Babesia motasi陽性率:0.75％。
　　本研究結(jié)果表明，長角血蜱為河南省流行蜱類優(yōu)勢種群，蟲體攜帶病原情況普遍，尤其是在樣品中檢測到了人畜共患病原嗜