中國(guó)芍藥品種遺傳多樣性SRAP分析和核心種質(zhì)的初步構(gòu)建.pdf

1、芍藥（Paeonia lactiflora Pall.）是我國(guó)的一種重要草本花卉，我國(guó)芍藥種質(zhì)資源十分豐富。在長(zhǎng)達(dá)數(shù)千年的栽培歷史中，受地域限制及多變氣候的影響，在自然選擇和人工選育的基礎(chǔ)上，其群體已經(jīng)產(chǎn)生了大量遺傳變異，形成了豐富的遺傳多樣性，有大量的傳統(tǒng)品種和珍貴品種亟待開發(fā)和利用。但隨著現(xiàn)代農(nóng)業(yè)的發(fā)展和社會(huì)經(jīng)濟(jì)的導(dǎo)向作用，芍藥的種質(zhì)資源不斷遭到破壞或喪失，因此重視和開展芍藥種質(zhì)資源的收集和保存工作，并同時(shí)進(jìn)行芍藥品種遺傳多樣性的研

2、究，有利于我國(guó)芍藥種質(zhì)資源的高效利用。
　　 本研究以中國(guó)芍藥種質(zhì)的150個(gè)品種為研究對(duì)象，以SRAP分子標(biāo)記為主要研究方法，對(duì)其資源的遺傳多樣性進(jìn)行研究，以期揭示不同品種間的親緣關(guān)系及其分類地位，為今后的資源研究、品種鑒定、育種親本選擇及優(yōu)異基因資源發(fā)掘利用提供依據(jù)；并在此基礎(chǔ)上初步構(gòu)建芍藥的核心種質(zhì)，以便資源的高效管理及遺傳多樣性的準(zhǔn)確利用。主要研究結(jié)果如下：
　　 1.確定了芍藥穩(wěn)定的SRAP-PCR擴(kuò)增試驗(yàn)。所得

3、反應(yīng)體系為：總體系體積25uL，其中10×PCR Buffer（100mmol·L-1Tris-HCl pH8.3，500mmol·L-1KCl）2.5uL，MgCl22.5 mmol·L-1，dNTP各0.25 mmol·L-1，引物各0.3μmol·L-1，TaqDNA聚合酶1U，DNA模板120ng。反應(yīng)程序?yàn)椋?5℃變性5分鐘，反應(yīng)前5個(gè)循環(huán)在94℃1min，35℃lmin，72℃1min條件下運(yùn)行；之后40個(gè)循環(huán)復(fù)性溫度為50

4、℃；最后72℃延伸10min，4℃保存。
　　 2.利用SRAP技術(shù)對(duì)我國(guó)芍藥150份種質(zhì)資源進(jìn)行了遺傳多樣性研究，從120個(gè)引物對(duì)中經(jīng)過(guò)兩次篩選，得到8個(gè)引物組合用于正式擴(kuò)增，共產(chǎn)生303條帶，其中286條為多態(tài)性條帶，多態(tài)性比率為94％，平均每個(gè)引物組合產(chǎn)生35.8個(gè)多態(tài)性條帶。每個(gè)組合的多態(tài)性條帶數(shù)24～44不等，單個(gè)引物組合的多態(tài)性比率在88.9％～100％之間。
　　 3.通過(guò)UPGMA聚類分析，芍藥種質(zhì)的遺傳

5、相似性系數(shù)在0.63～0.88之間。從聚類結(jié)果中可以看出，在相似性系數(shù)0.66處，所有品種被劃分為5大類群。該聚類結(jié)果非常復(fù)雜，但仔細(xì)深入分析，可以發(fā)現(xiàn)各分類群與地域來(lái)源和花色分類方案呈現(xiàn)一定的關(guān)聯(lián)，具有在地域性基礎(chǔ)上按花色進(jìn)行聚類的一般規(guī)律和特點(diǎn)，顯示中國(guó)芍藥品種地理資源的遺傳多樣性。
　　 4.嘗試對(duì)芍藥種質(zhì)資源進(jìn)行核心種質(zhì)構(gòu)建，在地域性分組的基礎(chǔ)上以分子標(biāo)記數(shù)據(jù)為主、表型性狀等傳統(tǒng)數(shù)據(jù)為輔的方法進(jìn)行聚類分層取樣，按照12％