番茄溫敏核不育系花藥培養(yǎng)相關(guān)因子的研究.pdf

1、本論文對(duì)番茄溫敏核不育系T7、T8花藥培養(yǎng)的研究主要包括了兩個(gè)方面：(1)番茄溫敏核不育系花粉粒各個(gè)發(fā)育時(shí)期的細(xì)胞學(xué)觀察試驗(yàn)；(2)番茄溫敏核不育系花藥培養(yǎng)。其中花藥培養(yǎng)主要包括了接種材料的消毒滅菌試驗(yàn)、花藥愈傷組織誘導(dǎo)試驗(yàn)、花藥愈傷組織分化試驗(yàn)三部分。主要試驗(yàn)結(jié)果如下：
　　 1、外植體消毒滅菌試驗(yàn)結(jié)果：
　　 T7花蕾的最佳滅菌處理為：0.1％HgCI210min+15％NaCI010min，其污染率和出愈率分別為4

2、0.6％和17.7％; T8的最佳天菌處理為：0.1％HgCI215min+10％NaCI015min，其污染率和出愈率分別為51.0％和18.3％:75％酒精對(duì)花蕾擦拭消毒滅菌處理，容易引起接種花藥褐化死亡。
　　 2、溫敏核不育系T7、T8及普通雜交品種王蔬、紅日4個(gè)番茄品系的不同發(fā)育時(shí)期花粉粒細(xì)胞學(xué)觀察結(jié)果：
　　 (1)花蕾長度約為0.2cm，其花粉粒發(fā)育處于二分體或四分體時(shí)期；(2)花蕾長度約為0.4～0.5c

3、m，其花粉粒發(fā)育處于單核早期；(3)花蕾長度約為0.6～0.7cm，其花粉粒發(fā)育處于單核靠邊期；(4)花蕾長度約為0.7～0.8cm，其花粉粒發(fā)育處于單核靠邊期或二核期；(5)花蕾長度約為1cm，其花粉粒發(fā)育處于二核或三核期；(6)花蕾長度約為lcm，花瓣展開小于90度，其花粉粒發(fā)育處于二核期、三核期或成熟期；(7)花蕾長度約為lcm，花瓣展開度大于90度，其花粉粒處于成熟期。
　　 3、花藥愈傷組織組織誘導(dǎo)試驗(yàn)結(jié)果：
　

4、　 (1)番茄花蕾的小孢子處于單核靠邊期為最佳取材時(shí)期，T7、T8、王蔬和紅日的花藥愈傷組織誘導(dǎo)率分別為11.8％，13.7％、18.0％和18.1％。
　　 (2)番茄花蕾經(jīng)4℃低溫預(yù)處理后對(duì)降低花藥褐化率，提高花藥愈傷組織質(zhì)量效果明顯；T7花蕾低溫預(yù)處理的適宜時(shí)間為24h，花藥愈傷組織誘導(dǎo)率為19.50％;T8花蕾低溫預(yù)處理的適宜時(shí)間為48h，花藥愈傷組織誘導(dǎo)率為19.00％;番茄普通雜交種王蔬、紅日花蕾低溫預(yù)處理的適宜時(shí)

5、間分別為36h和24h，愈傷組織誘導(dǎo)率分別達(dá)到28.57％、31.25％。
　　 (3)通過對(duì)2，4-D、NAA、KT、CPPU和6-BA等5種激素進(jìn)行雙因子激素組合的愈傷組織誘導(dǎo)比較試驗(yàn)，結(jié)果表明：番茄溫敏核不育系T7以KTlmg/L+NAA0.3mg/L組合的誘導(dǎo)效果最好，花藥愈傷組織誘導(dǎo)率為21.0％；番茄溫敏核不育系T8以6-BA2mg/L+NAA0.5 mg/L組合的誘導(dǎo)效果最好，花藥愈傷組織誘導(dǎo)率為17.5％。

6、>　　 (4) TDZ對(duì)番茄溫敏核不育系花藥愈傷組織誘導(dǎo)的最適培養(yǎng)濃度為0.02mg/L;花調(diào)素對(duì)番茄溫敏核不育系T7、T8花藥愈傷組織誘導(dǎo)的最適濃度分別為0.03mg/L、0.02mg/L;TDZ和花調(diào)素對(duì)花藥愈傷組織誘導(dǎo)均有促進(jìn)作用。
　　 (5)培養(yǎng)基中添加香蕉汁后，花藥容易褐化死亡，愈傷組織質(zhì)量降低，愈傷組織誘導(dǎo)率比對(duì)照處理低，差異顯著。
　　 (6)通過對(duì)KT、NAA、6-BA、2，4-D、TDZ和FR等6種

7、激素進(jìn)行多因子激素組合的愈傷組織誘導(dǎo)比較試驗(yàn)，番茄溫敏核不育系T7以6-BA3.0mg/L+2，4-D2.0mg/L+TDZ0.02mg/L組合的誘導(dǎo)效果最好，花藥愈傷組織誘導(dǎo)率為22.7％;T8以6-BA2.0 mg/L+2，4-D2.0 mg/L+TDZ0.02 mg/L組合的誘導(dǎo)效果最好，花藥愈傷組織誘導(dǎo)率為23.7％。
　　 (7)在培養(yǎng)基中添加椰子汁對(duì)番茄花藥愈傷組織的誘導(dǎo)有一定的促進(jìn)作用，愈傷組織誘導(dǎo)的適宜椰子汁濃度

8、為100ml/L, T7、T8出愈率分別為23.6％、21.3％。
　　 (8)采用將番茄花藥筒一分為二的接種方式可以減少對(duì)花藥的損傷，降低花藥褐化率，提高愈傷組織誘導(dǎo)率，T7、T8花藥褐化率分別為32.7％、30.7％，出愈率為26.7％、28.7％。
　　 (9)培養(yǎng)基中添加濃度為0.5mg/L的AgN03，能降低花藥褐化率，提高花藥愈傷組織誘導(dǎo)率和質(zhì)量，T7、T8花藥愈組褐化率分別為32.0％、30.0％；愈傷組織

9、誘導(dǎo)率分別為29.0％、27.3％。
　　 4、花藥愈傷組織分化試驗(yàn)結(jié)果表明：
　　 (1) MS對(duì)番茄溫敏核不育系花藥愈傷組織分化的效果優(yōu)干1/2MS、Miller和B5基本培養(yǎng)基，花藥愈傷組織的胚狀體發(fā)生數(shù)量最多。
　　 (2)在分化培養(yǎng)基中的蔗糖用量為20g/L時(shí)，花藥愈傷組織分化出較多的胚狀體和根。
　　 (3)通過對(duì)6-BA、2，4-D、TDZ、KT、NAA和IAA等6種激素進(jìn)行不同組合的愈傷組