新城疫F48E9毒株與Lasota毒株感染雞后外周血部分細(xì)胞因子差異表達(dá)的研究.pdf

1、新城疫病毒是危害世界養(yǎng)禽業(yè)最主要的病毒之一，新城疫病毒的危害性因毒株的不同而呈現(xiàn)出一定的差異。外周血是新城疫病毒在機(jī)體內(nèi)傳播重要的載體，同時(shí)外周血淋巴細(xì)胞也通過表達(dá)細(xì)胞因子控制病毒在體內(nèi)的傳播。為了解新城疫病毒強(qiáng)毒株與弱毒株在外周血中的載量變化規(guī)律以及不同毒力的新城疫病毒感染所引起的外周血淋巴細(xì)胞中細(xì)胞因子的差異表達(dá)狀況，在本研究中，使用了新城疫病毒強(qiáng)毒株F48E9株與弱毒株Lasota株分別感染SPF成年雞，同時(shí)使用一組未感染病毒的成

2、年雞作對(duì)照。在感染后0天、3天、7天、10天、14天、21天這6個(gè)時(shí)間點(diǎn)分別采集三組成年雞的外周血，進(jìn)行外周血總RNA的提取并且反轉(zhuǎn)錄，最后使用Real-time PCR技術(shù)對(duì)IFNalpha、IFNgamma、IL-2、IL-6、IL-10、IL-13、IL-15、IL-16、IL-18這9種細(xì)胞因子mRNA以及新城疫病毒F48E9毒株與Lasota毒株在外周血中的載量進(jìn)行檢測(cè)。
　　 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，新城疫病毒F48E9株在外

3、周血中的載量在感染病毒后迅速升高，在感染后7天達(dá)到峰值，拷貝數(shù)為8.56×106copies/mL，而后又迅速下降。與之相比，新城疫病毒Lasota株在外周血中的載量在感染后上升緩慢，于感染后10天達(dá)到峰值，拷貝數(shù)為6.60×106copies/mL，之后在外周血中的載量緩慢下降。兩毒株相比，F(xiàn)48E9株的峰值高于Lasota株的峰值，且F48E9株峰值出現(xiàn)早于Lasota株峰值出現(xiàn)時(shí)間。
　　 在細(xì)胞因子表達(dá)檢測(cè)方面，無論新城

4、疫病毒F48E9株還是新城疫病毒Lasota株均能夠引起IFN-γ在感染后的高效的表達(dá)，且其各自峰值與對(duì)照組相比呈現(xiàn)顯著差異；新城疫病毒F48E9毒株與新城疫病毒Lasota毒株相比，更能夠迅速的誘導(dǎo)外周血淋巴細(xì)胞當(dāng)中IFN-α與IFN-γ表達(dá)，且F48E9毒株與Lasota毒株相比F48E9誘導(dǎo)IFN-α表達(dá)的能力更強(qiáng)，而Lasota株誘導(dǎo)IFN-γ表達(dá)的能力更強(qiáng)。IL-2的mRNA的表達(dá)情況有所不同，僅Lasota株能夠誘導(dǎo)其高效表

5、達(dá)且其峰值與對(duì)照組相比呈現(xiàn)顯著差異，而F48E9株對(duì)IL-2的誘導(dǎo)效應(yīng)不明顯；與之相反，IL-10、IL-16、IL-18這三種細(xì)胞因子僅F48E9株能夠誘導(dǎo)高效表達(dá)且其峰值與對(duì)照組相比呈現(xiàn)顯著差異。同時(shí)在研究中還發(fā)現(xiàn)無論是F48E9株還是Lasota株均能夠誘導(dǎo)IL-13的高效表達(dá)，而二者對(duì)IL-15表達(dá)誘導(dǎo)的峰值與對(duì)照組相比無顯著差異。在實(shí)驗(yàn)中還發(fā)現(xiàn)在感染了新城疫病毒的成年雞外周血中各個(gè)時(shí)間點(diǎn)均不能檢測(cè)到IL-6的mRNA表達(dá)，而在

6、各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的對(duì)照組成年雞外周血中卻能夠檢測(cè)到IL-6的mRNA表達(dá)。
　　 實(shí)驗(yàn)證明，F(xiàn)48E9在外周血中載量的變化呈現(xiàn)上升迅速而下降迅速的趨勢(shì)，而Lasota在在外周血中載量的變化呈現(xiàn)上升緩慢而下降迅速的趨勢(shì)，F(xiàn)48E9毒株感染的成年雞在外周血中載量的峰值時(shí)間先于并高于Lasota毒株感染的成年雞。在新城疫病毒感染過程當(dāng)中，各個(gè)細(xì)胞因子的表達(dá)在F48E9毒株與Lasota毒株之間存在一定的差異，可能與感染病毒的毒力以及外周血中