番茄抗TYLCV相關分子標記篩選及其分子標記輔助選擇抗性聚合研究.pdf

1、番茄黃化曲葉病(Tomatoyellow leaf curl disease)已經成為世界番茄生產上的主要病害之一，近幾年，在我國迅速傳播，嚴重威脅到我國的番茄生產。該病由雙生病毒科菜豆金色花葉病毒屬番茄黃化曲葉病毒(Tomatoyellow leaf curl virus，TYLCV)引起，主要通過煙粉虱(Bemisia tabaci)。培育抗病品種是阻止該病蔓延的最根本有效的途徑，據報道，番茄栽培種種質資源中缺乏抗TYLCV的基因，

2、僅有一些表現(xiàn)為耐病的種質。高抗TYLCV的基因都存在于近緣野生種質中，目前已報道的抗番茄黃化曲葉病的近緣野生種主要有醋栗番茄(S.pimpinellifolium)、秘魯番茄(S.peruvianum)、多毛番茄(S.habrochaites)、智利番茄(S.chilense)和契斯曼尼番茄(S.cheesmanii)。因此，TYLCV的抗性育種很大程度上基于從野生種向栽培種中轉入抗性基因。
　　 本研究以抗病親本CLN2777

3、A和感病親本TMXA48-4-0及其F2分離群體為材料，應用AFLP和SSR兩種標記技術以及BSA法進行與抗TYLCV基因連鎖標記的篩選.同時利用國外開發(fā)的分別與抗TYLCV基因Ty-1，Ty-2，Ty-3連鎖的標記進行分子標記輔助選擇聚合研究，研究結果如下：⑴通過對親本及F2分離群體進行TYLCV接種，發(fā)現(xiàn)F2代抗感病分離比率接近3:1，表明抗性受單個顯性基因控制。用512對MseⅠ/PstⅠ引物組合對親本及F2代抗感基因池進行AFL

4、P分析，最終引物組合P15/M28與P16/M10在親本及抗感組間表現(xiàn)多態(tài)性，回收并克隆測序，兩片段大小分別為106bp，180bp，分別命名為P15M28-106，P16M10-180。重新設計引物，將P15M28-106成功轉化為CAPS標記，命名為P15M28。應用一個F2群體對其進行驗證，遺傳連鎖分析結果表明標記P15M28與抗性基因Ty-2之間的遺傳距離為8.8cM，可以應用于標記輔助選擇育種。除此之外，根據Kenta Shi

5、rasawa(2010)構建的番茄遺傳圖譜，選取11號染色體末端，TG36到TG393區(qū)間上的7個SSR標記，應用同樣的親本和F2群體進行篩選，發(fā)現(xiàn)一個與抗TYLCV連鎖的EST-SSR標記TES0344，與抗性基因遺傳距離為7.8 cM。⑵應用分別含有Ty-1，Ty-2，Ty-3三個抗TYLCV基因的育種材料TY52，CLN2777A，99S-C-39-20-1-1-24-17-0-0，以及三個園藝性狀優(yōu)良的感病材料Tmm9060-0