大白菜黃萎病病原菌鑒定及病株快速檢測技術研究.pdf

1、大白菜[Brassica rapaL.ssp.pekinensis(Lour.) Olsson]是我國栽培面積最大的蔬菜作物之一，并逐漸成為世界性蔬菜作物。目前對大白菜病害的研究多集中在病毒病、軟腐病、霜霉病三大病害上，而近年來在北京市農(nóng)林科學院蔬菜研究中心大白菜育種基地及云南省通海等大白菜規(guī)?；N植基地發(fā)生了十分嚴重的土傳維管束病害，并呈逐年上升趨勢。該病多在包心初期開始顯癥，其癥狀表現(xiàn)為葉片枯黃、植株矮化、維管束變褐變黑，被稱為“黃

2、萎病”。
　　 本研究以北京地區(qū)大白菜黃萎病植株為材料，進行黃萎病致病病原菌的分離、純化、保存，對病原菌進行形態(tài)學鑒定、致病力分析及分子鑒定研究，建立大白菜苗期抗黃萎病鑒定技術，并結合實時熒光定量PCR技術進行病原菌的快速檢測。主要研究結果如下:
　　 1.以大白菜黃萎病株3-85、10-2、J-15、和3-108為材料，分離純化得到的4個真菌分離物，分別命名為BCHW3-85、BCHW10-2、BCHW J-15和BC

3、HW3-108，通過形態(tài)學鑒定、苗期接種鑒定及分子鑒定，確定了大白菜黃萎病的病原菌為大麗輪枝菌（V.dahliae），最適生長溫度為22℃。
　　 2.采用兩因素試驗設計方法對大白菜黃萎病苗期抗性鑒定方法進行研究。分別采用浸根法(5 min、10 min、15 min)、灌根法、茵液催芽的接種方法，接種濃度設1×106、1×107、1×108三個梯度，接種后30d進行病情調查，結果表明:在大白菜三葉一心期使用孢子懸浮液（濃度1×

4、107或1×108 spores·mL-1），浸根10 min接種效果最佳。
　　 3.使用致病力較強的大白菜黃萎病病原茵B(yǎng)CHW10-2對大白菜、小白菜、蕪菁、蘿卜、芥藍、辣椒、青花菜、花椰菜、烏塌菜、甘藍、番茄、茄子等作物進行寄主范圍鑒定，結果表明大白菜黃萎病病原菌對以上作物均有致病性，且致病力強弱不同。
　　 4.大白菜黃萎病菌實時熒光PCR快速檢測方法研究:根據(jù)大麗輪枝菌ITS區(qū)序列JN564038與大白菜ITS