海芋的離體培養(yǎng)及其試管苗水培研究.pdf

1、本研究以海芋(Alocasia macrorrhiza)的種子、芽和花序?yàn)橥庵搀w，研究不同因素對(duì)海芋離體培養(yǎng)的影響，建立高效離體再生體系；以海芋的根狀莖和花序?yàn)橥庵搀w，進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)和植株再生的初探；以海芋試管苗為材料，研究了生根條件、pH值和營(yíng)養(yǎng)液濃度等對(duì)海芋水培的影響，并測(cè)定了不同pH值和不同濃度營(yíng)養(yǎng)液下海芋水培苗的葉綠素含量、保護(hù)酶活性、丙二醛含量等生理指標(biāo)的變化。主要研究結(jié)果如下： 1.海芋離體再生體系的建立

2、以海芋的種子、芽和花序?yàn)椴牧?，建立了離體再生體系，并分別研究了不同因素對(duì)試管苗增殖、壯苗生根和移栽的影響。結(jié)果表明：增殖的最佳培養(yǎng)基為MS+6-BA6mg·L-1+KT1.5 mg·L-1+IBA0.1 mg·L-1，增殖系數(shù)達(dá)到6.0以上，不同激素種類對(duì)試管苗增殖的影響依次為：6-BA>KT>IBA>NAA；增殖的最適白糖和瓊脂濃度分別為30g·L-1和5 g·L-1；不同光質(zhì)對(duì)增殖的影響依次為紅光>綠光>藍(lán)光>白光，對(duì)不同光質(zhì)下試管

3、苗的葉綠素含量及酶活性進(jìn)行了測(cè)定，發(fā)現(xiàn)白光下葉綠素含量最低，而POD、SOD和CAT活性最高，為增殖提供相關(guān)生理依據(jù)；不同光照強(qiáng)度對(duì)增殖的影響，結(jié)果表明1500 Lx的光照強(qiáng)度最適于增殖。壯苗生根的最佳培養(yǎng)基為1/2MS+1.0 g·L-1AC+2.0mg·L-1PP333，壯苗率達(dá)到82.50％。移栽的最佳基質(zhì)為草炭土：蛭石為3：1，移栽成活率達(dá)到93％。 2.海芋愈傷組織的誘導(dǎo)及植株再生 以海芋的根狀莖和花序?yàn)橥庵搀w

4、，進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)和植株再生的初探。以根狀莖為材料，研究不同濃度及組合的2，4-D和KT對(duì)愈傷組織誘導(dǎo)的影響，結(jié)果表明：最適于根狀莖愈傷組織誘導(dǎo)的2，4-D和KT濃度均為0.5 mg·L-1，2，4-D對(duì)愈傷組織誘導(dǎo)的影響大于KT，最佳愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+2，4-D0.5 mg·L-1+KT0.5 mg·L-1，愈傷組織誘導(dǎo)率平均達(dá)到81.67％。以海芋的幼嫩花序?yàn)椴牧?，研究不同濃?-BA和NAA及不同光照條件對(duì)愈傷組織誘導(dǎo)的影

5、響，結(jié)果表明：6-BA的濃度過高過低均不利于花序愈傷組織的誘導(dǎo)，以4 mg·L-1為宜。與黑暗條件相比，弱光更有利于促進(jìn)花序愈傷組織的形成。海芋根狀莖愈傷組織轉(zhuǎn)接后，組織褐化。一段時(shí)間后，在褐化的愈傷組織上又可以長(zhǎng)出新的愈傷，且可以在MS+6-BA6 mg·L-1+KT1.5 mg·L-1+IBA0.1 mg·L-1的培養(yǎng)基上分化出芽點(diǎn)。海芋的花序在形成愈傷組織的同時(shí)伴隨著芽的發(fā)生。花序愈傷組織在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)可以直接再

6、生成完整植株。 3.海芋試管苗水培條件的研究 以海芋試管苗為材料，研究適于其水培生根的生根劑種類和濃度、適宜的營(yíng)養(yǎng)液酸堿度及濃度。結(jié)果表明：綜合考慮生根率、根數(shù)、根長(zhǎng)和根粗4項(xiàng)指標(biāo)，以1 mg·L-1 IBA的生根效果最佳；綜合考慮新根發(fā)生株數(shù)、新根數(shù)和新葉數(shù)3項(xiàng)指標(biāo)及植株的腐爛情況，海芋試管苗水培適宜的pH值在6.0-6.5之間；綜合考慮不同濃度的營(yíng)養(yǎng)液水培30 d后海芋試管苗株高、莖粗、葉長(zhǎng)、葉寬和葉片數(shù)的增幅，以1

7、/2營(yíng)養(yǎng)液濃度為最佳，1/4營(yíng)養(yǎng)液濃度的水培效果次之。 4.海芋試管苗水培生理變化的研究 以海芋水培苗為材料，研究不同pH值和不同濃度營(yíng)養(yǎng)液對(duì)其生理指標(biāo)的影響。結(jié)果表明：pH為6.0時(shí)，海芋水培植株的葉綠素含量、POD、SOD、CAT活性均達(dá)到最高，MDA含量最低；營(yíng)養(yǎng)液濃度為1/2 Hoagland時(shí)，植株的葉綠素含量、POD、SOD、CAT活性均達(dá)到最高，MDA含量最低。與清水對(duì)照、1/4和全量Hoagland營(yíng)養(yǎng)液