小菜蛾對阿維菌素抗性的分子機(jī)制研究.pdf

1、小菜蛾是世界性的十字花科蔬菜的重要害蟲，同時也是抗藥性產(chǎn)生和發(fā)展最嚴(yán)重的害蟲之一。阿維菌素是目前用于防治小菜蛾的主要藥劑之一，小菜蛾對其也產(chǎn)生了嚴(yán)重的抗藥性，為了明確小菜蛾對阿維菌素的產(chǎn)生抗性的原因。本研究于室內(nèi)進(jìn)行阿維菌素的抗性選育和交互抗性測定，利用RT-PCR和RACE技術(shù)克隆了小菜蛾對阿維菌素抗性、敏感種群的基因的全長序列，并進(jìn)行序列比對分析；利用熒光定量PCR技術(shù)對其抗性、敏感種群GluClα基因的mRNA表達(dá)量進(jìn)行了定量分析

2、與比較。結(jié)果如下： （1）利用室內(nèi)選育的抗阿維菌素小菜蛾種群和敏感種群分析了小菜蛾對阿維菌素的抗性發(fā)展規(guī)律，結(jié)果表明：小菜蛾對阿維菌素的抗性呈現(xiàn)先慢后快的特點；阿雛菌素抗性品系對5種殺蟲劑的抗性譜測定結(jié)果表明：AVMs抗性種群對菜喜、甲維鹽（甲胺基阿維菌素苯甲酸鹽）、茚蟲威均表現(xiàn)出不同程度的交互抗性，其中以對甲維鹽的交互抗性倍數(shù)最高，達(dá)8．85倍，而對溴蟲腈、氟蟲腈兩種藥劑的生測結(jié)果表明，AVMs抗性種群與其無交互抗性。

3、 （2）首次成功的克隆了小菜蛾對阿維菌素的抗性和敏感種群GluClα基因的全長序列。該基因全長2167bp，開放閱讀框為1344bp，編碼447個氨基酸；包含了GluCl家族和α亞基的一些典型結(jié)構(gòu)特征，與其它昆蟲GluClα亞基氨基酸序列的相似性在70%-80%之間?？剐苑N群相對于敏感種群，核甘酸序列中發(fā)生了7個堿基替換，其中有三個堿基替換引起了氨基酸的突變，分別為186位的半胱氨酸（C）被酪氨酸（Y）替換；336位的脯氨酸（P）在抗性