魚(yú)體組織中多種有機(jī)氯農(nóng)藥殘留同時(shí)檢測(cè)技術(shù)的建立及其應(yīng)用.pdf

1、本文針對(duì)現(xiàn)有我國(guó)動(dòng)物性食品有機(jī)氯農(nóng)藥測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)方法中普遍存在的檢測(cè)種類較少、或目標(biāo)化合物提取步驟繁瑣且溶劑消耗量大、或凈化技術(shù)不完善、或待測(cè)物色譜峰未完全分離、或標(biāo)準(zhǔn)中未對(duì)水產(chǎn)品作“適用性”規(guī)定等等不足之處，通過(guò)研究目標(biāo)化合物提取、樣品凈化和色譜分離等技術(shù)，利用電子捕獲氣相色譜（GC-ECD）和氣相色譜-離子阱-多級(jí)質(zhì)譜（GC-IT-MS/MS）技術(shù)，建立了一次進(jìn)樣能同時(shí)測(cè)定魚(yú)體組織中19種有機(jī)氯農(nóng)藥的方法。應(yīng)用該技術(shù)，研究了長(zhǎng)江中、上

2、游圓口銅魚(yú)（Coreius guichenoti）和中華鱘（Acipenser sinensis）魚(yú)體內(nèi)有機(jī)氯農(nóng)藥的殘留水平，主要研究?jī)?nèi)容及其結(jié)果如下：
　　 1．研究并建立了魚(yú)體組織中19種有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量同時(shí)測(cè)定的GC-ECD方法。目標(biāo)化合物提取采用將試樣搗碎后加入正己烷-丙酮（1：1）溶劑，置高速分散機(jī)上攪拌提取的方法；樣品凈化應(yīng)用凝膠滲透色譜（GPC）技術(shù)或固相萃?。⊿PE）技術(shù)（試樣脂肪含量≤1.0％）；色譜分離采用中

3、等極性色譜柱。本方法靈敏度（S/N=3）為0.08～1.40μg/L，平均值為0.51μg/L。草魚(yú)空白肌肉組織中添加濃度為2、10μg/kg時(shí)，平均回收率分別為80.2％和94.9％，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）低于10％；檢測(cè)限（LOD，S/N=3）和定量限（LOQ，S/N=10）分別為0.02～0.413μg/kg和0.07～1.44μg/kg。LOQ低于歐盟在魚(yú)體中設(shè)置的最大殘留限量標(biāo)準(zhǔn)、日本“肯定列表制度”中一律標(biāo)準(zhǔn)和中國(guó)魚(yú)類食品中

4、的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。本方法被成功地應(yīng)用于長(zhǎng)江圓口銅魚(yú)肌肉和肝臟組織中多種有機(jī)氯農(nóng)藥的同時(shí)測(cè)定。
　　 2．研究并建立了魚(yú)體組織中19種有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量同時(shí)測(cè)定的GC-IT-MS/MS方法。樣品前處理程序采用與GC-ECD方法中相同的樣品測(cè)定步驟。儀器條件采用EI電離模式，選擇不同的監(jiān)測(cè)母離子和特征離子。方法能靈敏測(cè)定加標(biāo)試樣中全部19種目標(biāo)化合物，二級(jí)質(zhì)譜比一級(jí)質(zhì)譜靈敏度更高，檢測(cè)限更低，本底噪聲更小。添加水平為5.0μg/kg的19種

5、OCPs的加標(biāo)回收率為78.8～106％，其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為4.8～11．O％；19種OCPs的LOD和LOQ分別為0.02～1.22μg/kg和0.10～4.27μg/kg。研究得出了19種OCPs的碰撞誘導(dǎo)解離（CID）電壓，建立了19種OCPs二級(jí)質(zhì)譜庫(kù)。應(yīng)用該方法對(duì)GC-ECD法測(cè)定圓口銅魚(yú)肌肉和肝臟樣中被檢出的有機(jī)氯農(nóng)藥進(jìn)行了定性確證。
　　 3．確定了魚(yú)體組織中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留測(cè)定的程序、凈化技術(shù)應(yīng)用范圍和技術(shù)關(guān)鍵點(diǎn)

6、r>　　 （1）試樣搗碎后將其完全暴露于提取溶劑中，然后離心、取上清液的浸漬-振蕩法可成為首選的目標(biāo)物提取方法。
　　 （2）樣品凈化有三種方法可供選擇，即①硫酸磺化法、②SPE法和③GPC法?！阿佟辈贿m合狄氏劑和異狄氏劑的測(cè)定?！阿凇敝荒苡糜诤康陀?.0％的試樣?！阿邸笔亲钣行У膬艋椒?。
　　 （3）SPE法可采用吸附填料（中性Al2O3）不少于15 g的自制玻璃萃取柱。GPC法需通過(guò)測(cè)定加標(biāo)回收率或觀察紫外吸

7、收?qǐng)D譜來(lái)確定餾分收集時(shí)間；收集液需過(guò)商品型的中性Al2O3柱（1000 mg）進(jìn)一步凈化。
　　 （4）GC-ECD儀器工作條件：色譜柱溫度采用程序升溫，初始溫度不高于100℃。升溫階梯和速率與檢測(cè)參數(shù)的數(shù)量成正比。色譜柱采用中極性色譜柱。若同時(shí)測(cè)定DDTs和硫丹，應(yīng)采用涂膜厚度（DF）為0.5μm的色譜柱，其他有機(jī)氯農(nóng)藥同時(shí)檢測(cè)也可采用DF為0.25μm的色譜柱。同時(shí)檢測(cè)六氯苯和五氯硝基苯不能用VF-1701MS中等極性色譜柱

8、。
　　 （5）GC-MS儀器工作條件：可采用EI源的二級(jí)質(zhì)譜分析技術(shù)，不采用一級(jí)質(zhì)譜和不提倡采取三級(jí)以上的質(zhì)譜技術(shù)。但是，七氯和硫丹Ⅰ由于一級(jí)和二級(jí)質(zhì)譜的信躁比相差不大，故對(duì)其分析也可采取一級(jí)質(zhì)譜技術(shù)。色譜分離采用VF-1701MS中等極性色譜柱。
　　 4．應(yīng)用該技術(shù)研究了長(zhǎng)江圓口銅魚(yú)和中華鱘體內(nèi)中有機(jī)氯農(nóng)藥的殘留水平
　　 （1）HCHs主要蓄積在魚(yú)體肝臟，其次是脂肪組織，肌肉組織中殘留量較低，主要為γ-H

9、CH所貢獻(xiàn)，β-HCH和δ-HCH未檢出。3齡以上圓口銅魚(yú)肝臟內(nèi)的HCHs為30.1～38.7μg/kg，分別較其脂肪和肌肉組織高3.5倍和7倍。魚(yú)體肝臟中HCHs殘留量隨魚(yú)體重增大而增加，具有顯著性差異，但脂肪和肌肉組織中無(wú)此規(guī)律。中華鱘卵中的HCHs為15.8μg/lg，精液中未檢出HCHs。
　　 （2）魚(yú)體各組織中DDT主要由P，P'-DDE所貢獻(xiàn)，p，p'-DDE占DDTs的70.0％左右。DDTs在肝臟中的殘留量是其

10、脂肪組織的2～5倍、肌肉組織的20～50倍。不同年齡組魚(yú)體肌肉組織中的DDTs殘留量相差不大，但肝臟中的DDTs隨其魚(yú)的體重增大而增加，3齡以上圓口銅魚(yú)肝臟中DDTs在410μg/kg以上。中華鱘肌肉和卵中DDTs的殘留量分別為71μg/kg和521μg/kg，p，p'-DDE占DDTs的90.1％，其中一尾中華鱘卵中的DDTs和p，p'-DDT’分別為906μg/kg和73.7μg/kg。中華鱘精液中DDTs未檢出。
　　 （

11、3）p，p'-DDT是DDT的原形物，2齡以上圓口銅魚(yú)肝臟和脂肪組織中，p，p'-DDT均有檢出，其p，p'-DDT均值分別為10.2和27.1μg/kg，在個(gè)別圓口銅魚(yú)樣的肝臟組織中達(dá)到了55.5～60.5μg/kg。
　　 （4）對(duì)比不同水域的魚(yú)體中HCH、DDT殘留量的研究報(bào)道，長(zhǎng)江圓口銅魚(yú)和中華鱘肌肉組織中HCH和DDT的殘留水平較低。
　　 （5）從中華鱘生活史分析，其體內(nèi)較高濃度的DDT殘留可能來(lái)自海洋環(huán)境而