白頭翁(Pulsatilla chinensis)對AA肉雞抗菌促生長作用機理研究.pdf

1、有研究表明，白頭翁（Publsatilla chinensis）除具有抗菌和抗病原作用外，還具有提高機體免疫力、抑制巨噬細胞分泌、抗癌、抗炎、抗毒、止瀉、鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、殺滅滴蟲和球蟲、抑制腸蠕動、抗內毒素血癥等作用。本研究旨在確認白頭翁素是白頭翁中抗菌主要活性成分，研究白頭翁對肉雞免疫功能、生產性能和生理功能的影響，探討白頭翁促生長作用機理。為進一步開發(fā)白頭翁作抗菌飼料添加劑應用提供科學依據。
　　 試驗一水蒸氣蒸餾法制備白頭翁素

2、。稱取適量白頭翁，粉碎，加約適量水的水，置40℃水浴鍋24 h，用旋轉蒸發(fā)儀減壓蒸餾，收集蒸餾液，冷卻，除去浮在上面的不溶性雜質，加氯化鈉，用氯仿振萃取，合并提取液，減壓蒸去溶劑，遺留灰黃色具有刺激性的油狀液體，為粗制原白頭翁素，靜置數天，重結晶，白頭翁素結晶析出。經高效液相色譜和核磁共振分析是白頭翁素。
　　 試驗二白頭翁浸膏對血清指標和肉雞生產性能的影響。用白頭翁浸膏作為添加劑，分別選用1日齡健康AA肉雛雞480只進行42

3、d的飼養(yǎng)試驗，隨機分成5組，即基礎日糧組（對照）；添加白頭翁浸膏0.5％組、1％組和2％組；抗生素組。測定不同處理組肉雞的增重、飼料轉化率以及血清生化指標。結果發(fā)現：白頭翁浸膏能促進肉雞生長和改善料重比，與對照組相比，2％白頭翁浸膏添加組效果最好，42d體重提高了5.42％（P<0.05），飼料轉化率改善了5.50％（P<0.05）；且提高了肉雞42d的血清總蛋白和白蛋白含量（P<0.05），T3、T4水平，GOT和GPT略有提高，但差

4、異不顯著（P>0.05）。
　　 試驗三白頭翁抗菌作用研究。（1）體外試驗：用白頭翁水煎液、白頭翁素通過牛津杯法作體外的抑菌試驗，結果顯示：0.5％水煎液、1％水煎液和0.1％白頭翁素對大腸桿菌、變形桿菌、陰溝腸桿菌都有抑菌作用，其中0.1 mg/mL白頭翁素對大腸桿菌、變形桿菌抑菌圈直徑大于0.4 mg/L恩諾沙星。（2）體內試驗：用白頭翁浸膏作為添加劑進行飼養(yǎng)試驗，選用肉雞及分組同試驗一。采用平板計數法統(tǒng)計肉雞盲腸大腸桿菌和

5、乳酸菌數量，觀察白頭翁對雞腸道菌群影響，通過體內外試驗驗證白頭翁素抑菌一致作用。結果顯示：在前期不同濃度的白頭翁浸膏添加組中大腸桿菌數量的分別比空白組減少2.73％、8.45％和9.94％（P>0.05）；后期時白頭翁浸膏各組中乳酸菌比空白組有上升的趨勢，差異不顯著（P>0.05）。
　　 試驗四白頭翁對肉雞免疫功能的影響。（1）體外試驗：采用MTT法比較了100、200、400、800 mg/mL白頭翁水蒸餾液對肉雞脾淋巴細胞

6、增值的影響。結果發(fā)現，4種濃度白頭翁蒸餾液均能刺激ConA誘導的脾淋巴細胞增殖，400、800 mg/mL濃度組呈顯著水平（P<0.05）；4種白頭翁蒸餾液在對LPS誘導的脾淋巴細胞增殖均有顯著增強作用（P<0.05）。且增殖作用隨白頭翁濃度增加而增強。（2）體內試驗：用白頭翁浸膏作為添加劑進行飼養(yǎng)試驗，選用肉雞及分組同試驗一。分別在21、42日齡屠宰取樣，計算免疫器官胸腺、脾臟與法氏囊器官指數。結果表明：在前期，與對照組相比，添加0.

7、50％、1％白頭翁浸膏組脾臟指數提高12.84％、14.68％（P>0.05），添加0.5％，1％，2％濃度組使肉雞胸腺指數分別提高了20.98％、1.95％、12.68％（P>0.05），添加0.5％，1％，2％濃度組法氏囊指數分別提高了2.94％，12.41％，6.86％（P>0.05）；在后期，與對照組相比，0.5％、1％和2％白頭翁浸膏組使肉雞脾臟指數分別提高了9.65％、14.04％、10.52％（P>0.05），胸腺指數分別

8、提高了7.31％、3.65％，8.68％（P>0.05），法氏囊指數分別提高了47.62％、52.38％和47.62％，差異顯著（P<0.05）。
　　 試驗五白頭翁對肉雞抗氧化功能影響的研究。用白頭翁浸膏作為添加劑進行飼養(yǎng)試驗，選用肉雞及分組同試驗一。分別在21、42日齡采血，測定血清中超氧化物歧化酶（SOD），谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-PX）活性。結果顯示：在前期，SOD在白頭翁浸膏添加組和對照組之活性沒有顯著變化（P>0

9、.05），GSH-PX在白頭翁浸膏添加各組均高于對照組，2％添加組值達顯著水平（P<0.05）；在后期，SOD在白頭翁浸膏各組值均顯著高于對照組（P<0.05），GSH-PX在白頭翁浸膏添加各組均高于對照組，但差異不顯著（P>0.05）。
　　 結果顯示，白頭翁素是白頭翁屬植物抑菌的主要活性成分，白頭翁具有抑制肉雞大腸桿菌生長、促進乳酸菌生長，能夠改善菌群環(huán)境的作用；白頭翁能提高肉雞免疫器官生長、延緩淋巴器官退化，白頭翁蒸餾液能