不結(jié)球白菜耐熱性分子標(biāo)記及耐熱基因片段的克隆.pdf

1、本文對不結(jié)球白菜耐熱性狀的分子標(biāo)記、熱激處理下的生理生化機(jī)制進(jìn)行了相關(guān)研究，其主要內(nèi)容如下：
　　 1.研究了與耐熱基因緊密連鎖的RAPD、SSR、SRAP分子標(biāo)記，利用不結(jié)球白菜耐熱品種‘蘇州青’和熱敏感品種‘矮腳黃’雜交的F2群體為材料，通過田間調(diào)查，采用極耐熱單株和極熱敏感單株分別構(gòu)建耐熱池和熱敏感池，篩選了RAPD、SSR、SRAP等引物。結(jié)果表明：在所篩選的156對SSR引物中只有一條引物DBC17在耐熱池中擴(kuò)增出多態(tài)

2、性片段，通過189株F2單株驗(yàn)證后，證明DBC17與耐熱基因連鎖，其遺傳距離為11.6cM；而其他兩種標(biāo)記均沒有找到與耐熱基因緊密連鎖的分子標(biāo)記。
　　 2.以不結(jié)球白菜品種‘蘇州青’（耐熱）和‘矮腳黃’（熱敏感）幼苗為材料進(jìn)行熱激處理，測定了熱激處理對不結(jié)球白菜葉片中保護(hù)酶活性，丙二醛（MDA）含量以及膜透性的影響。結(jié)果表明，熱激處理后，耐熱品種葉片中SOD、POD、CAT活性的增幅大于熱敏感品種，相比對照分別增加29.7％、

3、23.6％、54.6％；熱敏感品種葉片中丙二醛（MDA）的含量和電滲率的增幅大于耐熱品種，相比對照分別增加207.7％、445.5％。由此表明：在高溫環(huán)境中，耐熱品種細(xì)胞膜穩(wěn)定性要高于熱敏感品種，耐熱品種可以通過自身的調(diào)節(jié)積累較少量的MDA；耐熱品種相對于熱敏感品種具有更高的清除體內(nèi)自由基的能力，能夠有效抵御自由基對機(jī)體的傷害，防御膜脂過氧化，從而有效地抵御熱害。
　　 3.利用已發(fā)表的大白菜耐熱相關(guān)蛋白基因序列設(shè)計(jì)引物，以不結(jié)

4、球白菜抗熱品種‘蘇州青’和熱敏感品種‘矮腳黃’幼苗為試驗(yàn)材料，通過RT-PCR技術(shù)，獲得了兩個(gè)不結(jié)球白菜耐熱基因的cDNA特異片段序列，分別命名為BcHsp1、BcHsp2。序列分析發(fā)現(xiàn)，不結(jié)球白菜BcHsp1、BcHsp2基因核苷酸特異片段序列長度分別為157bp、343bp，編碼52和114個(gè)氨基酸殘基。推導(dǎo)的氨基酸序列與已登錄的大白菜S2、S13基因同源性高達(dá)100％。實(shí)時(shí)定量PCR分析表明，在熱激處理下，耐熱基因在‘蘇州青’中的