豬鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因的克隆與組織分布.pdf

1、為了研究豬鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白在鋅離子轉(zhuǎn)運(yùn)中的作用，本試驗(yàn)依據(jù)人、大鼠、小鼠和牛的鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因的序列對(duì)豬的ESTs數(shù)據(jù)庫和UniGene進(jìn)行搜索，利用搜索的ESTs拼接序列設(shè)計(jì)引物進(jìn)行RT-PCR，對(duì)豬的9個(gè)鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因進(jìn)行克隆，然后又對(duì)各個(gè)基因在豬的18種組織中的分布進(jìn)行初探。主要結(jié)果如下： 1、豬鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白ZnT-1基因slc30A1的克隆與組織分布。 克隆的豬slc30A1基因包含一個(gè)完整的開放閱讀框架（open rea

2、ding frame，ORF），長(zhǎng)度為1521bp，編碼由506個(gè)氨基酸殘基組成的ZnT-1蛋白，其中酸性氨基酸為93個(gè)，堿性氨基酸為66個(gè)，分子量為55．13 kDa，等電點(diǎn)為6．543。預(yù)測(cè)的信號(hào)肽區(qū)為1-29aa，成熟的ZnT-1由477個(gè)氨基酸組成。該基因在大腦、卵巢、子宮、乳腺、食道、十二指腸、空腸、盲腸、結(jié)腸、直腸、心臟、肝臟、肺臟和肌肉14種組織中有分布。 2、豬鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白ZnT-2基因slc30A2的克隆與組織分

3、布。 克隆的豬slc30A2基因包含一個(gè)完整的開放閱讀框架（open reading frame，ORF），長(zhǎng)度為1044bp，編碼由348個(gè)氨基酸殘基組成的ZnT-2蛋白，其中酸性氨基酸為50個(gè)，堿性氨基酸為41個(gè)，分子量為37．95 kDa，等電點(diǎn)為6．703。該基因在卵巢、食道、盲腸、直腸、肺臟和腎臟6種組織中有分布。 3、豬鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白ZnT-3基因slc30A3的克隆與組織分布。 克隆的豬slc30A3基

4、因包含一個(gè)完整的開放閱讀框架（open reading frame，ORF），長(zhǎng)度為1164bp，編碼由388個(gè)氨基酸殘基組成的ZnT-3蛋白，其中酸性氨基酸為49個(gè)，堿性氨基酸為42個(gè)，分子量為41．64 kDa，等電點(diǎn)為6．501。該基因在大腦、卵巢、子宮、乳腺、食道、盲腸、結(jié)腸、直腸、心臟、肝臟、肺臟和腎臟11種組織中有分布。 4、豬鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白ZnT-4基因slc30A4的克隆與組織分布。 克隆的豬slc30A4基

5、因包含一個(gè)完整的開放閱讀框架（open reading frame，ORF），長(zhǎng)度為1287bp，編碼由429個(gè)氨基酸殘基組成的ZnT-4蛋白，其中酸性氨基酸為72個(gè)，堿性氨基酸為54個(gè)，分子量為47．54 kDa，等電點(diǎn)為6．917。該基因在卵巢、乳腺、食道、十二指腸、盲腸、心臟和肺臟7種組織中有分布。 5、豬鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白ZnT-5基因slc30A5的克隆與組織分布。 克隆的豬slc30A5基因包含一個(gè)完整的開放閱讀框架

6、（open reading frame，ORF），長(zhǎng)度為2301bp，編碼由767個(gè)氨基酸殘基組成的ZnT-5蛋白，其中酸性氨基酸為94個(gè)，堿性氨基酸為94個(gè)，分子量為84．34 kDa，等電點(diǎn)為7．415。該基因在大腦、卵巢、乳腺、食道、空腸、盲腸、結(jié)腸、直腸、心臟、肝臟、肺臟和腎臟12種組織中有分布。 6、豬鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白ZnT-6基因slc30A6的克隆與組織分布。 克隆的豬slc30A6基因包含一個(gè)完整的開放閱讀框架

7、（open reading frame，ORF），長(zhǎng)度為1383bp，編碼由461個(gè)氨基酸殘基組成的ZnT-6蛋白，其中酸性氨基酸為63個(gè)，堿性氨基酸為47個(gè)，分子量為51．04 kDa，等電點(diǎn)為9．275。該基因在大腦、卵巢、乳腺、食道、十二指腸、空腸、盲腸、結(jié)腸、直腸、心臟、肝臟、肺臟、腎臟和肌肉14種組織中有分布。 7、豬鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白ZnT-7基因slc30A7的克隆與組織分布。 克隆的豬slc30A7基因包含一個(gè)完

8、整的開放閱讀框架（open reading frame，ORF），長(zhǎng)度為1128bp，編碼由376個(gè)氨基酸殘基組成的ZnT-7蛋白，其中酸性氨基酸為56個(gè)，堿性氨基酸為49個(gè)，分子量為41．54 kDa，等電點(diǎn)為6．943。該基因在大腦、卵巢、子宮、乳腺、食道、十二指腸、盲腸、結(jié)腸、直腸、心臟、肝臟、肺臟、腎臟和肌肉14種組織中有分布。 8、豬鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白ZnT-8基因slc30A8的克隆與組織分布。 克隆的豬slc30A

9、8基因是一個(gè)突變體，克隆出的序列長(zhǎng)度為1333bp，因突變而產(chǎn)生的生物學(xué)功能尚未研究。本試驗(yàn)僅在回腸中發(fā)現(xiàn)該基因有分布。 9、豬鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白ZnT-9基因slc30A9的克隆與組織分布。 克隆的豬slc30A9基因包含一個(gè)完整的開放閱讀框架（open reading frame，ORF），長(zhǎng)度為1698bp，編碼由566個(gè)氨基酸殘基組成的ZnT-9蛋白，其中酸性氨基酸為108個(gè)，堿性氨基酸為79個(gè)，分子量為63．22 kD