水稻花期特異性調(diào)控基因的陣列檢測和驗(yàn)證.pdf

1、通過比較群體水平上的豐度表達(dá)差異,并與特定表型進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析,明確有眾多基因參與水稻孕穗、開花和灌漿過程并具時(shí)序表達(dá)特征.著重對(duì)檢測到的可能的水稻MADS box基因同源物表達(dá)譜、新基因系譜和已知基因的功能進(jìn)行了討論,將基因表達(dá)豐度特異性的改變與雄蕊-心皮分化發(fā)育相聯(lián)系、與胚胎發(fā)育和果實(shí)成熟等生命進(jìn)程相聯(lián)系、與稻米品質(zhì)、口感、營養(yǎng)價(jià)值和風(fēng)味形成相聯(lián)系.以水稻孕穗期總mRNA作探針,與cDNA微陣列上的核酸雜交時(shí),得到一批與花器官發(fā)育相關(guān)的

2、基因在群體水平上的表達(dá)譜.其中既有功能域,又有受其調(diào)控的功能基因.以下列基因?yàn)榇?bZIP型轉(zhuǎn)錄因子、MADS box蛋白(OsMADS45) mRNA、Dof鋅指蛋白、乙醇脫氫酶1-乙醇脫氫酶2區(qū)域、光系統(tǒng)II 23 kDa多肽、赤霉素-調(diào)節(jié)的蛋白、細(xì)胞色素p450單加氧酶、25S核糖體RNA基因、天冬氨酸蛋白酶、腺苷三磷酸合酶6、鄰氨基苯甲酸羥基肉桂?；?苯甲?；D(zhuǎn)移酶、S-期-特異性核糖體蛋白、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶、蔗糖合酶、組蛋白h

3、3、胚胎-特異性(Ose705) mRNA、富甘氨酶RNA結(jié)合蛋白2 mRNA (OsGRP2)、熱激蛋白70、二磷酸核苷激酶和水通道蛋白rwc-2.以水稻開花期總mRNA作探針,與cDNA微陣列上的核酸雜交時(shí),得到一批與雌雄蕊發(fā)育相關(guān)的基因在群體水平上的表達(dá)譜.其中既有與雄蕊有關(guān)的,雙有與雌蕊和胚胎發(fā)生有關(guān)的,還有與雌雄蕊都有關(guān)的基因.以水稻灌漿期總mRNA作探針,與cDNR微陣列上的核酸雜交時(shí),得到一批與種子貯藏物相在的基因在群體水

4、平上的表達(dá)譜.以水稻蜂花粉總mRNA作探針,與cDNA微陣列上的核酸雜交時(shí),得到一批與雄蕊相關(guān)的基因在群體水平上的表達(dá)譜.它們是:3-酮脂酰載體蛋白合酶iii和硬脂酰-ACP脫飽和酶等.為了全局性分析基因表達(dá)譜以及進(jìn)一步驗(yàn)證它們與開花過程的相關(guān)性,選取參與水稻開花過程和胚胎發(fā)育過程的基因:查爾酮合酶、?；d體蛋白Ⅱ、醇溶蛋白、S-腺苷基甲硫氨酸還原酶、過敏反應(yīng)蛋白等為探針,與1500個(gè)水稻RNA斑點(diǎn)陣列進(jìn)行雜交時(shí),結(jié)果證實(shí):醇溶蛋白和過