水稻不育系康豐A稻瘟病抗性的遺傳分析和基因定位.pdf

1、稻瘟病是全世界范圍內(nèi)分布最廣、危害程度最大的稻作病害，選擇抗性品種用于研究抗瘟基因的遺傳規(guī)律和開展抗性基因的定位與克隆具有十分重要的意義，發(fā)現(xiàn)、利用和聚合稻瘟病抗性基因?qū)⑹情_展稻瘟病抗性育種的工作重點。本研究以三明市農(nóng)科院選育的抗稻瘟病三系不育系康豐A為研究材料，采用康豐B（康豐A的同型保持系）、感病品種麗江新團(tuán)黑谷（LTH），以及以康豐B為母本，麗江新團(tuán)黑谷為父本配制雜交組合獲得F1后經(jīng)自交構(gòu)建的F2群體為遺傳群體材料，利用初步篩選的

2、12JL-606-1、12JL-907-1、12YT-兩優(yōu)2186-1、13YT-本地冬-1、13TN06-5和12JN-兩優(yōu)084-3等6個稻瘟病菌株進(jìn)行親本抗性分離試驗，最終確定12JL-907-1為試驗菌株對遺傳群體進(jìn)行接種、記載觀察、統(tǒng)計與遺傳分析；采用稻瘟病菌株12JL-907-1侵染F2遺傳群體材料，獲得極端感病單株，與抗病親本康豐B單株、感病親本LTH單株和抗病F2單株共同組成的稻瘟病抗性基因定位群體，利用隱性群體分析法（

3、RCA）結(jié)合分離群體分析法（BSA），采用Mapmaker/3.0軟件，對康豐A（B）的抗病基因進(jìn)行SSR連鎖性分析與位點預(yù)測。主要研究結(jié)果如下：
　　1、康豐A（B）對供試的6個菌株均表現(xiàn)出極端抗病反應(yīng)（HR），說明康豐A（B）對福建省水稻主要產(chǎn)區(qū)稻瘟病群體具有良好的抗性。利用菌株12JL-907-1對1960株F2代單株進(jìn)行噴霧接種，出現(xiàn)3:1的抗感分離比（1492R:468S），表明康豐A（B）對菌株12JL-907-1的抗

4、性由一對獨立遺傳的細(xì)胞核顯性基因控制，暫時命名為Pi-kf2(t)。
　　2、通過篩選均勻分布在水稻1～12號染色體上的554對SSR引物對康豐A（B）和麗江新團(tuán)黑谷（LTH）的DNA進(jìn)行SSR多態(tài)性引物篩選，發(fā)現(xiàn)對親本PCR擴(kuò)增產(chǎn)物具有多態(tài)性的引物58對，所占比例為10.5％。再通過F2群體抗、感基因池多態(tài)性篩選，結(jié)果發(fā)現(xiàn)共有6個SSR標(biāo)記引物對抗、感基因池PCR擴(kuò)增產(chǎn)物表現(xiàn)出多態(tài)性。進(jìn)一步利用利用隱性群體分析法（RCA）結(jié)合分

5、離群體分析法（BSA），對康豐A（B）的抗病基因進(jìn)行SSR連鎖性分析，以對菌株JL-907-1極端感病的344株極端感病F2單株為作圖群體，采用Mapmaker3.0/MapDraw軟件，對緊密連鎖的SSR標(biāo)記和抗稻瘟病基因進(jìn)行遺傳連鎖分析并作圖，將康豐A稻瘟病抗性基因Pi-kf2(t)初步定位在第6號染色體，處于第6號染色體中上部，具體位于SSR引物RM7572和RM19730之間，Pi-kf2(t)與RM7572之間的相對遺傳距離為

6、1.3cM，與RM19730之間的相對遺傳距離為5.7cM。
　　3、通過比對Orygenesdb和Gramene等數(shù)據(jù)庫結(jié)合國家水稻數(shù)據(jù)中心（http://www.ricedata.cn/index.htm）稻瘟病抗性基因位置的報道，對6號染色體上已定位的稻瘟病抗病位點的物理位置進(jìn)行分析，并與Pi-kf2(t)進(jìn)行比對，結(jié)果表明，兩個SSR標(biāo)記引物（RM7572~RM19730）之間尚未有已定位到的抗稻瘟病基因。因此，康豐A（B