改良的大豆子葉節(jié)轉(zhuǎn)基因方法.pdf

1、隨著基因工程技術(shù)的發(fā)展,采用遺傳轉(zhuǎn)化導(dǎo)入外源基因,改善大豆品質(zhì)及抗病抗逆性,已成為大豆改良的重要方法之一。本文從多個(gè)層面對(duì)轉(zhuǎn)基因方法的原理和進(jìn)展作了詳細(xì)綜述,最終選取相對(duì)高效的農(nóng)桿菌介導(dǎo)法作為大豆轉(zhuǎn)基因的基礎(chǔ)研究方法,并從種子消毒,外植體選擇,農(nóng)桿菌侵染和共培養(yǎng),以及各培養(yǎng)時(shí)期植物激素種類和濃度等方面作了分析研究,以探討大豆轉(zhuǎn)基因優(yōu)化研究步驟,以期在一定程度上達(dá)到提高轉(zhuǎn)基因效率的目的。
　　 本文以蘇云金芽孢桿菌(Bacillu

2、s thuringiensis)毒性蛋白基因Bt為目的基因,先研究未進(jìn)行轉(zhuǎn)染時(shí)期11種不同硼酸濃度處理對(duì)大豆子葉節(jié)叢生芽再生的影響,再從中選取代表性的硼酸濃度處理誘導(dǎo)期轉(zhuǎn)染的大豆,觀察三種硼酸濃度對(duì)大豆再生叢生芽轉(zhuǎn)基因的影響,結(jié)果表明不加入硼酸時(shí)表現(xiàn)為嚴(yán)重缺硼癥狀,不僅生長點(diǎn)沒有長出,而且根的生長也受到嚴(yán)重抑制。結(jié)果表明高濃度硼酸有較多的愈傷組織形成,外植體短期內(nèi)容易死亡,不利于轉(zhuǎn)基因叢生芽的再生。適宜濃度硼酸培養(yǎng)基誘導(dǎo)的大豆叢生芽長勢(shì)