水稻紋枯病及稻瘟病拮抗菌的分離與抗性成分分析.pdf

1、水稻紋枯病和稻瘟病是對(duì)水稻危害最嚴(yán)重的病害，嚴(yán)重地制約了水稻的發(fā)展。目前防治這兩類病害的方法主要包括化學(xué)防治、抗性育種以及生物防治。過度使用化學(xué)農(nóng)藥會(huì)造成環(huán)境的污染，給人類和動(dòng)物帶來危害。生物防治與抗性育種相配合，展現(xiàn)出了防治病害的新前景。
　　 本研究分離獲得了一株對(duì)水稻紋枯病和稻瘟病均有很強(qiáng)抑制活性的菌株，命名為Osm-1。通過形態(tài)學(xué)觀察、生理生化檢測(cè)以及16S rDNA序列的測(cè)定，鑒定菌株Osm-1為生理生化指標(biāo)特殊的短小

2、芽孢桿菌(Bacillus pumilus)。
　　 該菌株的無菌發(fā)酵液對(duì)紋枯病的抑菌率高達(dá)97.1％。對(duì)稻瘟的抑制率在50％以上。田間小區(qū)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)含菌發(fā)酵液對(duì)稻瘟病具有一定的防治效果，噴施后水稻稻瘟病感病率降低51.5個(gè)百分點(diǎn)。
　　 菌株Osm-1產(chǎn)生的抗菌物質(zhì)經(jīng)過70％的丙酮處理后，上清液仍有活性。有較強(qiáng)的極性，易溶于水，不溶于正丁醇、乙酸乙酯以及氯仿。該物質(zhì)具有較好的熱穩(wěn)定性和酸穩(wěn)定性。100℃高溫處理10min

3、后仍有活性。酸處理不加熱，活性穩(wěn)定，加熱后活性喪失。堿處理無論加熱與否活性均喪失。經(jīng)過MCI大孔吸附樹脂以及高效液相色譜等分離純化方法獲得較純的單體物質(zhì)。采用LC-TOF/MS測(cè)定該物質(zhì)的分子量為454.1806，數(shù)據(jù)庫比對(duì)未發(fā)現(xiàn)相似分子量的化合物。目前從芽孢桿菌屬次生代謝的抗菌物質(zhì)包括蛋白質(zhì)、酶、脂肽類以及多肽類，分子量均在1000以上，少數(shù)非肽類抗生素如amicoumacinA分子量為423，均與本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)的抗性成分不同，推測(cè)該物質(zhì)