獸藥殘留分析技術(shù)進(jìn)展

1、獸藥殘留分析技術(shù) 與殘留檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室建設(shè),第一部分 獸藥殘留及其危害,獸藥,典型的獸藥是指用于預(yù)防和治療畜禽疾病的藥物。隨著集約化養(yǎng)殖生產(chǎn)的開(kāi)展，一些化學(xué)的、生物的藥用成分被開(kāi)發(fā)成具有某些功效的動(dòng)物保健品或飼料添加劑，也屬于獸藥的范疇。獸藥的主要用于防病治病、促進(jìn)生長(zhǎng)、提高生產(chǎn)性能、改善動(dòng)物性食品的品質(zhì)等。,獸藥在動(dòng)物性食品中的殘留,獸藥的原形化合物及其代謝物在動(dòng)物的細(xì)胞、組織、器官或可食性產(chǎn)品（如

2、奶、蛋）中的蓄積、貯存，稱為食品動(dòng)物的獸藥殘留。（狹義）化學(xué)物殘留：除獸藥外還包括通過(guò)食物鏈進(jìn)入動(dòng)物體內(nèi)的農(nóng)藥（如殺蟲(chóng)劑、除草劑等）和環(huán)境污染物(如重金屬、霉菌毒素等)。（廣義）,獸藥在生態(tài)環(huán)境中的殘留,在生產(chǎn)中大量使用的抗菌藥物、抗寄生蟲(chóng)藥物及各種促生長(zhǎng)制劑等藥物都會(huì)以原形或以有活性的代謝產(chǎn)物形式隨動(dòng)物糞便、尿液或其他排泄物進(jìn)入環(huán)境。這些物質(zhì)在環(huán)境土壤、微生物、水生生物、植物等蓄積或貯存。,獸藥殘留的產(chǎn)生,外因獸藥和添加劑的

3、使用 --防治動(dòng)物疫病 --使用藥物添加劑環(huán)境污染物內(nèi)因獸藥的體內(nèi)過(guò)程 --消除規(guī)律,獸藥殘留的產(chǎn)生,獸藥殘留產(chǎn)生的主要原因不遵守休藥期的規(guī)定標(biāo)簽外用藥 --劑量、劑型、給藥途徑、療程、適應(yīng)癥、動(dòng)物非法使用違禁藥物污染 --飼料加工、貯藏、運(yùn)輸,獸藥殘留的危害,急性毒性作用（瘦肉精）慢性毒性作用（氯霉素、氨基糖苷類）特殊毒性作用（三致作用、激素樣作用、過(guò)敏反應(yīng)） --

4、雌激素類（己烯雌酚）、同化激素（苯丙酸諾龍）--喹惡啉類（卡巴氧）--硝基呋喃類（呋喃西林、呋喃它酮）--砷制劑--苯并咪唑類--殺蟲(chóng)劑（666）--氯羥吡啶、SM2等--甲醛、苯酚等,獸藥殘留的危害,對(duì)人類腸道微生物的影響 --破壞或抑制人體胃腸菌群中敏感菌的生長(zhǎng) --導(dǎo)致條件性病原菌的大量繁殖或體外病原菌侵入腸道 --改變腸道菌群的代謝活性，使菌群改變藥物和食物固有活性和毒性的的生物轉(zhuǎn)化能力發(fā)生變化

5、--引起細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生，導(dǎo)致人類感染性疾病治療的失敗,第二部分 獸藥殘留分析技術(shù),獸藥殘留分析技術(shù)的特點(diǎn),待測(cè)物質(zhì)濃度低樣品基質(zhì)復(fù)雜，干擾物質(zhì)多獸藥殘留代謝產(chǎn)物多樣或不明動(dòng)物種類多樣，對(duì)藥物代謝存在差異,殘留標(biāo)示物的選擇,用藥后體內(nèi)存在多個(gè)殘留成分，則需要監(jiān)控總殘留物?？倸埩粑镌隗w內(nèi)的各組分比例相對(duì)穩(wěn)定，選擇總殘留物中1種或2種組分作為“參照物”，稱為“殘留標(biāo)示物”。通過(guò)測(cè)定殘留標(biāo)示物的含量表示樣品殘留量和MRLs。

6、選擇殘留標(biāo)示物的原則 --消除慢、含量高、穩(wěn)定、毒性大,獸藥殘留分析方法的要求,快速高通量定量準(zhǔn)確度和精確度確證法定要求質(zhì)控要求,獸藥殘留分析方法的要求,ELISA,LC/MS/MS,,,,,LC or GC,,分析方法的總體思路,高水平(Level Ⅰ)方法 --確證和定量被分析物質(zhì) 中等水平(Level Ⅱ)方法 --定量但不需要確證被分析物質(zhì)低水平(Level Ⅲ)方法 --篩選,分析方法的

7、總體思路,采用快速、大量檢測(cè)樣品的篩選分析方法，能鑒別含有殘留物的陽(yáng)性樣品,采用充分可靠的分析方法，殘留量的值不具有確證性，但具相應(yīng)的準(zhǔn)確度和有效性,采用經(jīng)過(guò)確認(rèn)的分析方法對(duì)殘留物進(jìn)行鑒別和測(cè)定，殘留量的值必須是有效和肯定的,,,酶聯(lián)免疫法,液相色譜法氣相色譜法,液質(zhì)聯(lián)用法氣質(zhì)聯(lián)用法,,,,,,三級(jí),二級(jí),一級(jí),“篩選”到“確證”的方法體系,定性定量,三級(jí)方法,二級(jí)方法,一級(jí)方法,定性為主,定量為主,定性為輔,GC/MS

8、,LC/MS,GC,HPLC,獸藥殘留分析技術(shù),用于殘留分析的樣本制備技術(shù)樣品的前處理技術(shù)殘留檢測(cè)方法的選擇,樣本的范圍,可食性組織及產(chǎn)品 --肝、腎、肌肉、脂肪、皮膚、血液 --奶、蛋 --其他加工食品其他 --毛發(fā)、尿、糞便等,樣本的收集,取樣方法 --代表性原則、隨機(jī)采樣 --各種標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定活體檢測(cè) --一般采集毛發(fā)、血液、尿液和糞便屠宰場(chǎng)取樣 --藥物的靶組織 --其他高濃度的樣

9、本：肝、腎、膽汁、注射部位 --排泄物：尿液,樣本的貯存,容器材料 --一般為玻璃或塑料預(yù)處理 --勻化、縮分、過(guò)篩、離心、過(guò)濾、防腐、抑制降解等貯存溫度要求,樣品前處理技術(shù),提取方法 --組織搗碎法 --振蕩法凈化方法 --液—液萃取 --液—固萃取濃縮與富集 --旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮 --氣流吹蒸法：氮?dú)?、空?樣品的前處理技術(shù)——提取,提取,化合物特性,基質(zhì)組成,提取劑選擇,沉淀劑選擇

10、,設(shè)計(jì)順序,效率試驗(yàn)配比試驗(yàn),干擾試驗(yàn)影響凈化,樣品的前處理技術(shù)——凈化,凈化,液液萃取,SPE純化,相似相溶,小柱選擇,濃縮富集,效率試驗(yàn)配比試驗(yàn),上樣洗滌洗脫,殘留檢測(cè)方法簡(jiǎn)介,快速篩選方法 --酶免疫測(cè)定(EIA) --ELISA --放射免疫測(cè)定法(RIA) --金標(biāo)試紙條(Dip stick) --生物傳感器 --微生物抑制測(cè)定法：抗菌藥 --TLC,殘留檢測(cè)方法簡(jiǎn)介,化學(xué)定量方法 -

11、-氣相色譜法（GC） --高效液相色譜法（HPLC） --原子熒光(AF) --原子吸收(AA),殘留檢測(cè)方法簡(jiǎn)介,儀器確證方法 --HPLC-PDA --GC-MS --GC-MS-MS --HPLC-MS --LC-MS-MS,樣品處理技術(shù)進(jìn)展,SPE的應(yīng)用與自動(dòng)化膜分離技術(shù)免疫親和色譜(IAC)凝膠滲透色譜（GPC）分子印跡技術(shù)其他技術(shù)（自動(dòng)索氏提取法、超聲波輔助提取、超臨界流體萃取、強(qiáng)化

12、溶劑萃取、微波輔助萃取、加速溶劑萃取法）,色譜分析技術(shù)進(jìn)展,超高效液相色譜系統(tǒng)(UPLC),色譜分析技術(shù)進(jìn)展,高效毛細(xì)管電泳色譜系統(tǒng)(HPCE),色譜分析技術(shù)進(jìn)展,高精密度串聯(lián)質(zhì)譜——GC-MS/MS、LC-MS/MS,色譜分析技術(shù)進(jìn)展,高精密度串聯(lián)質(zhì)譜——GC-MS/MS,色譜分析技術(shù)進(jìn)展,高精密度串聯(lián)質(zhì)譜——LC-MS/MS,色譜分析技術(shù)進(jìn)展,高分辨質(zhì)譜系統(tǒng)(Q-TOF、Q-Exactive),檢測(cè)技術(shù)發(fā)展趨勢(shì)分析,檢測(cè)方法,篩選方

13、法,確證方法,快速簡(jiǎn)便,價(jià)格便宜,現(xiàn)場(chǎng)應(yīng)用,注重時(shí)效性,儀器更新快,多組分分析,靈敏度高,提高準(zhǔn)確性,限制我國(guó)殘留檢測(cè)發(fā)展的問(wèn)題,問(wèn)題：標(biāo)準(zhǔn)依賴性強(qiáng)，但標(biāo)準(zhǔn)滯后?！獦?biāo)準(zhǔn)制修訂程序化、效應(yīng)化,導(dǎo)致：標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施效果較差。——標(biāo)準(zhǔn)出臺(tái)后很快又被淘汰——現(xiàn)有標(biāo)準(zhǔn)限制了檢測(cè)技術(shù)發(fā)展,限制我國(guó)殘留檢測(cè)發(fā)展的問(wèn)題,問(wèn)題：照搬國(guó)外的殘留監(jiān)控內(nèi)容?！獧z測(cè)方法缺乏驗(yàn)證——缺乏藥理研究，沒(méi)有“中國(guó)特色”的MRL,導(dǎo)致：殘留檢測(cè)基礎(chǔ)較差。——對(duì)不

14、同藥物的殘留關(guān)注程度不一,警惕殘留檢測(cè)發(fā)展的誤區(qū),誤區(qū)一：“兩極”分化,檢測(cè)方法,篩選方法,確證方法,成本上升,一物多用,注重首創(chuàng),忽略了篩選方法的初衷,儀器追新型,盲目多殘留,水平看指標(biāo),過(guò)猶不及不切實(shí)際,沒(méi)有聯(lián)系,警惕殘留檢測(cè)發(fā)展的誤區(qū),誤區(qū)二：習(xí)慣“參考”,方法可行,數(shù)據(jù)可信,撰稿發(fā)表,內(nèi)容相似,知其然，而不知所以然,難以提升自身水平,警惕殘留檢測(cè)發(fā)展的誤區(qū),誤區(qū)三：只認(rèn)“原形”,藥物,藥物原形,代謝物,缺乏藥代動(dòng)力學(xué)研

15、究，盲目檢測(cè),正確引導(dǎo)殘留檢測(cè)發(fā)展方向,積極研究藥物代謝和殘留消除規(guī)律,藥理學(xué),藥效研究,藥代研究,藥物對(duì)機(jī)體的實(shí)際作用,機(jī)體內(nèi)藥物的生物轉(zhuǎn)化,藥物的生物利用度,藥物的標(biāo)示殘留物,藥物劑型研究,消除規(guī)律研究,確定監(jiān)控的靶點(diǎn),制定休藥期,危險(xiǎn)性評(píng)估,正確引導(dǎo)殘留檢測(cè)發(fā)展方向,重視飼料投入品的調(diào)查和監(jiān)測(cè),飼料藥物添加劑,國(guó)外引進(jìn),人用藥品,企業(yè)自創(chuàng),禁用化合物清單,允許添加的藥物,出現(xiàn)干擾物質(zhì),有特征組分,未知組分分析,新添加物,第三部分

16、 殘留檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室建設(shè),殘留實(shí)驗(yàn)室的功能,動(dòng)物性食品中獸藥殘留檢測(cè)飼料產(chǎn)品中違禁藥物(危害物質(zhì))檢測(cè)殘留分析技術(shù)的推廣應(yīng)用殘留分析技術(shù)的研發(fā)和標(biāo)準(zhǔn)化工作,殘留實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)要求,硬件要求 —實(shí)驗(yàn)場(chǎng)地、格局、設(shè)施 —設(shè)備、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、試劑耗材 —人員軟件要求 —資質(zhì)認(rèn)證與管理體系建設(shè),實(shí)驗(yàn)室建設(shè)的硬件要求,實(shí)驗(yàn)場(chǎng)地和格局面積要大。根據(jù)具體功能分割，不同實(shí)驗(yàn)室要求不一。 （天平

17、室不宜太大，儀器室不宜太小）根據(jù)實(shí)驗(yàn)流程分割。明確每個(gè)實(shí)驗(yàn)室名稱，避免功能混亂。,功能實(shí)驗(yàn)室,樣品保存室天平室（稱量）樣品預(yù)處理室（組織勻漿、飼料粉碎、分樣）樣品檢測(cè)室（ELISA檢測(cè)）儀器分析室（大型儀器設(shè)備）清洗消毒室試劑保存室（危險(xiǎn)化學(xué)品）耗材保存室標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)保存室,實(shí)驗(yàn)室建設(shè)的硬件要求,必要設(shè)施安全設(shè)施：消防裝置、報(bào)警裝置等。環(huán)境設(shè)施：空調(diào)、通風(fēng)柜、排氣扇、去濕機(jī)等。防護(hù)設(shè)施：醫(yī)藥箱、沖淋裝置

18、。三廢收集與處理設(shè)施。,實(shí)驗(yàn)室建設(shè)的硬件要求,設(shè)備(按流程分類)樣本的保存設(shè)備：冰箱、培養(yǎng)箱等。樣品前處理設(shè)備：勻漿機(jī)、粉碎機(jī)、濃縮儀等。檢測(cè)用設(shè)備：酶標(biāo)儀、HPLC、LC-MS/MS等。設(shè)備(按功能分類)主要設(shè)備：出具檢測(cè)數(shù)據(jù)。輔助設(shè)備：對(duì)檢測(cè)數(shù)據(jù)有一定的影響。,主要檢測(cè)用儀器設(shè)備,主要檢測(cè)項(xiàng)目,實(shí)驗(yàn)室建設(shè)的硬件要求,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) —標(biāo)準(zhǔn)品和對(duì)照品 —標(biāo)準(zhǔn)溶液常用試劑 —水 —固體試劑

19、 —液體試劑專用試劑 —試劑盒,實(shí)驗(yàn)室建設(shè)的硬件要求,常用耗材玻璃儀器（包括小容量玻璃儀器）塑料制品（離心管、槍頭等一次性用品）防護(hù)用品（手套、護(hù)目鏡等）專用耗材色譜耗材（色譜柱、樣品瓶等）前處理耗材（SPE小柱、濾膜等）保存用耗材(密封袋、標(biāo)準(zhǔn)溶液瓶),實(shí)驗(yàn)室建設(shè)的硬件要求,人員了解行業(yè)動(dòng)態(tài)，關(guān)注食品安全。沒(méi)有固定專業(yè)要求，但要有化學(xué)實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。大型儀器要盡量配備具有操作經(jīng)驗(yàn)的人員。有較高的結(jié)

20、果分析能力和判斷能力。,實(shí)驗(yàn)室建設(shè)的軟件要求,資質(zhì)認(rèn)證與實(shí)驗(yàn)室管理體系建設(shè),實(shí)驗(yàn)室建設(shè)的軟件要求,《檢測(cè)和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力的通用要求》25要素,組織管理體系文件控制要求、標(biāo)書(shū)和合同評(píng)審分包服務(wù)和供應(yīng)品采購(gòu)服務(wù)客戶投訴不符合檢測(cè)工作的控制記錄控制改進(jìn)糾正措施預(yù)防措施內(nèi)部審核管理評(píng)審,,管理要素,,技術(shù)要素,總則人員設(shè)施和環(huán)境條件檢測(cè)方法及方法的確認(rèn)設(shè)備測(cè)量溯源性抽樣樣品處置檢測(cè)結(jié)果質(zhì)量保證結(jié)果報(bào)