對(duì)大腦皮層形態(tài)學(xué)改變的實(shí)驗(yàn)

1、一氧化碳中毒動(dòng)物模型復(fù)制和形態(tài)學(xué)技術(shù)實(shí)驗(yàn),形態(tài)學(xué)中心實(shí)驗(yàn)室,賈雪梅,1.掌握形態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)基本方法和技能 2.熟悉一氧化碳中毒模型復(fù)制的基本程序3.熟悉實(shí)驗(yàn)論文撰寫的方法與步驟4.了解圖像分析和激光共聚焦顯微鏡技術(shù)應(yīng)用,目的和要求,實(shí)驗(yàn)內(nèi)容,通過一氧化碳中毒實(shí)驗(yàn),了解復(fù)制動(dòng)物模型基本過程；通過尼氏體染色，觀察一氧化碳中毒對(duì)動(dòng)物大腦皮質(zhì)神經(jīng)元結(jié)構(gòu)的影響；通過免疫組化染色，觀察一氧化碳對(duì)神經(jīng)元內(nèi)神經(jīng)營養(yǎng)因子活性的影響；通過圖像

2、分析，對(duì)免疫組化染色結(jié)果進(jìn)行定量分析。,技術(shù)路線,實(shí)驗(yàn)組 對(duì)照組 取材 石蠟包埋 切片 Nisslbody染色 免疫組織化學(xué)染色 共聚焦顯微鏡 圖像分析技術(shù),,,,,一氧化碳中毒模型復(fù)制,未處理,,,,,

3、,,一氧化碳中毒實(shí)驗(yàn),目的和要求,1．熟悉一氧化碳中毒實(shí)驗(yàn)方法及 操作技巧。2．掌握一氧化碳吸入所致大腦皮層 結(jié)構(gòu)的形態(tài)學(xué)變化。,原 理,一氧化碳中毒，紅細(xì)胞內(nèi)血紅蛋白與一氧化碳結(jié)合，而與氧結(jié)合能力降低，進(jìn)而導(dǎo)致組織缺氧。 腦組織缺氧可導(dǎo)致腦體積增大，腦溝變淺，腦回增寬，切面見點(diǎn)狀出血；小灶狀壞死；神經(jīng)元變性、壞死；小膠質(zhì)細(xì)胞增生、腫脹、吞噬脂質(zhì)而呈泡沫狀等一系列病理變化。,材 料,1．動(dòng)物：小鼠或大鼠

4、； 2．器材：手術(shù)刀、手術(shù)剪、解剖鑷、 試管、廣口瓶、制做切片的系列 儀器和設(shè)備；3．試劑：一氧化碳；,操作步驟,1．將動(dòng)物分為2組， 把小鼠放入廣口瓶內(nèi)；,2．實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物： 給予一氧化碳吸入，待小鼠出現(xiàn)明顯呼吸困難、煩躁、暈厥時(shí)開瓶塞，使小鼠蘇醒； 對(duì)照組動(dòng)物： 不吸入一氧化碳；,3．第二天重復(fù)上述操作， 連續(xù)四天， 致小鼠急性中毒死亡；,4. 切開小鼠皮膚， 用鉗子打開顱骨，