石油降解菌群的構建及其固定化研究初探.pdf

1、近年來，隨著海洋資源的開發(fā)和利用，海洋受到了嚴重的污染，其中石油污染尤為突出。海上石油及其產品污染是最重要的生態(tài)學災難性污染之一，海洋石油開采和管道化以及商船運輸都是潛在的流動污染源。以微生物為主體的生物修復技術以其投入小、無二次污染的優(yōu)勢被視為最有前途的治理手段。但低水溫、寡營養(yǎng)以及海水的沖刷等因素都會直接影響微生物降解石油的效率，加之石油組分的復雜性，使得海洋石油污染的生物修復技術較之其他的生物修復技術更為復雜。本研究針對海洋石油污

2、染治理技術研究領域的難點，開展了石油降解菌的定向馴化、石油降解菌群的構建與優(yōu)化以及石油降解菌（群）的固定化研究，為成功地運用生物修復技術治理海洋石油污染提供有力的技術支撐。主要研究結果如下:
　　1、從紅樹林濕地沉積物中，采用轉接和非轉接方法，在無柴油污染下、2％(V/V)柴油濃度下和5％(V/V)柴油濃度下馴化得到了6組土著石油降解菌群，采用氣相色譜—質譜聯(lián)用技術(Gas chromatograph-mass spectrome

3、ter，GC/MS)測定了6組土著石油降解菌群對柴油的降解率。結果顯示，源于轉接組的菌群對柴油的降解率為19％～32％，源于非轉接組的菌群對柴油的降解率為24％～54％。以2％柴油濃度馴化得到的菌群對柴油的降解效果最好，降解率分別為32％和54％。
　　2、從紅樹林濕地沉積物中分離得到11株石油降解菌，GC/MS測定了各菌株對柴油的降解能力，結果表明:11株單菌對柴油均有一定的降解能力，兩周后降解率為13％～44％。根據11株單菌

4、的降解能力和降解譜構建了5組石油降解菌群，并測定了菌群在柴油為唯一碳源培養(yǎng)十周后對柴油的降解能力。結果表明，經過十周的培養(yǎng)，降解菌群對柴油的降解率達64％～73％。降解主要發(fā)生在培養(yǎng)的前兩周，其降解率占總降解率的71％。
　　3、通過單因素實驗探討了影響降解菌群對柴油降解能力的因素。結果顯示，初始pH、培養(yǎng)溫度和初始柴油濃度能夠明顯影響石油降解菌群的降解能力，而初始鹽度、搖床轉速和初始接種量對石油的降解能力影響不大。結果表明在以下

5、條件下對石油的降解率最高達71.8％:初始pH為7，培養(yǎng)溫度為28℃，初始石油濃度為1％(V/V)。
　　4、以聚氨酯泡沫(Polyurethane foam，PUF)為載體材料對石油降解菌（群）進行固定化培養(yǎng)。采用平板計數法、熒光計數法和掃描電鏡(Scanning electronmicroscope，SEM)評價PUF對降解單菌和菌群的固定化效果。結果顯示 PUF在2h時對石油降解菌有較大的固定化密度(2.4×1010cell