杏鮑菇菌渣纖維素降解菌的篩選、復(fù)合菌劑構(gòu)建及應(yīng)用.pdf

1、為了利用纖維素降解菌提高食用菌菌渣發(fā)酵效果，促進(jìn)菌渣循環(huán)利用，本文從菌渣中采集樣品進(jìn)行微生物分離培養(yǎng)，并通過測定纖維素酶活性，開展了菌渣纖維素高效降解菌的篩選、復(fù)合菌系構(gòu)建及應(yīng)用研究，并得到以下主要結(jié)果:
　　(1)從菌渣中采集樣品分離培養(yǎng)，通過剛果紅透明圈實(shí)驗(yàn)、濾紙條降解試驗(yàn)和纖維素酶活力測定，篩選得到4株纖維素降解能力強(qiáng)的細(xì)菌(FB7、CB1、BC11、BC12)，經(jīng)16S rDNA序列鑒定，F(xiàn)B7、CB1為芽孢桿菌屬的2個(gè)種

2、、BC12屬于叢毛單胞菌屬（Comamonas sp.）、BC11為白色鏈霉菌（Streptomyces albus），其中FB7液體培養(yǎng)4d時(shí)，F(xiàn)PA、CMCase、C1、β-Gase的酶活性與其他菌株相比最高，分別為22.81 U·g-1、314.5 U·g-1、2.7 U·g-1、188.09 U·g-1，為篩選到的最優(yōu)菌株。
　　(2) FB7與BC11、BC12、CB1隨機(jī)組合，構(gòu)建11種復(fù)合菌劑，經(jīng)濾紙條降解試驗(yàn)和纖維

3、素酶活性測定，復(fù)合菌(CB1+BC11+FB7)在第6d時(shí)將濾紙降解成糊狀，F(xiàn)PA酶在第3-4 d達(dá)到最大值31.98 U·g-1，培養(yǎng)第5 d CMCase、C1、β-Gase酶的活性為133.61 U·g-1、2.31 U·g-1、217.21U·g1。
　　(3)菌渣堆肥中加入復(fù)合菌(處理B，CB1+BC11+FB7)和有機(jī)發(fā)酵菌曲（處理A）堆體的溫度上升較快。發(fā)酵過程中，加入菌劑的處理A、B的堆體溫度高于對照。FPA酶活性

4、在整個(gè)發(fā)酵過程中均高于CK，說明接種復(fù)合菌劑能使堆肥中纖維素酶活性顯著提高。對雙孢蘑菇產(chǎn)量統(tǒng)計(jì)，處理A、B總產(chǎn)量與對照相比略有提高，但差異不顯著。
　　(4)利用高通量方法對發(fā)酵過程中細(xì)菌多樣性進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)加入微生物菌劑后可以增加菌渣發(fā)酵過程中物種豐富度，改變?nèi)郝浣Y(jié)構(gòu)組成。處理A、B的香濃指數(shù)(Shannon index)大于對照，表明物種多樣性增加。Proteobacteria(變形菌門)、Bacteroidetes(擬桿菌門)

5、、Acidobacteria(酸桿菌門)、Verrucomicrobia(疣微菌門)、Planctomycetes(浮霉菌門)以及Actinobacteria(放線菌門)是3個(gè)處理發(fā)酵過程中的主要細(xì)菌門類，但各類微生物在3個(gè)處理中所占比例完全不同。其中，處理A的優(yōu)勢菌是Candidatus_Nitrososphaera、Bacillus sp.，處理B和對照的優(yōu)勢菌分別為Pedobacter、Acinetobacter和Comamona