MBR處理水產(chǎn)養(yǎng)殖廢水體系中微生物研究.pdf

1、本文針對膜生物反應(yīng)器（Membrane-Bioreactor，簡稱MBR）處理水產(chǎn)養(yǎng)殖廢水工藝特點(diǎn)，使用末端標(biāo)記限制性片段長度多態(tài)性分析(Terminal Restriction Fragment Length Polymorphism,簡稱T-RFLP）、高通量測序、16S rDNA序列分析等分子生物學(xué)技術(shù)并輔以菌株的生理生化特性試驗(yàn)，研究了膜生物反應(yīng)器處理水產(chǎn)養(yǎng)殖廢水系統(tǒng)中微生物結(jié)構(gòu)和優(yōu)勢菌群。同時，從MBR中分離獲得了一株好氧反硝

2、化細(xì)菌，并通過實(shí)驗(yàn)證實(shí)了菌株的反硝化性能；使用16S rDNA序列初步分析鑒定了可分離菌的種類。旨在為MBR反應(yīng)器細(xì)菌結(jié)構(gòu)研究以及MBR調(diào)試運(yùn)行提供參考。本研究得出的結(jié)論如下：
　?。?）穩(wěn)定運(yùn)行時，實(shí)驗(yàn)濃度條件下MBR反應(yīng)器出水能夠滿足《淡水池塘養(yǎng)殖水排放要求》中養(yǎng)殖廢水排放一級排放標(biāo)準(zhǔn),特別是對MBR反應(yīng)器對水產(chǎn)養(yǎng)殖廢水中的COD、NH4+-N均有較好的處理效果，對COD去除率在91％以上，對NH4+-N的去除率在87%以上。

3、
　?。?）在MBR反應(yīng)器活性污泥培養(yǎng)過程中，微生物的演替過程，既有原始優(yōu)勢種群的衰減，也有新的優(yōu)勢種群的增強(qiáng)，優(yōu)勢種群的功能地位處于動態(tài)變化中。
　　（3）MBR反應(yīng)器處理水產(chǎn)養(yǎng)殖廢水體系中主要優(yōu)勢菌有未培養(yǎng)的變形菌(unc ultured_delta_proteobacterium)、未培養(yǎng)的土壤細(xì)菌（uncultured_soil_bacterium）、未培養(yǎng)的腐螺旋菌(uncultured_Saprosp.irace

4、ae_bacterium)、未培養(yǎng)的擬桿菌門（un cultured_Bacteroidetes_bacterium）、未培養(yǎng)地發(fā)菌屬（uncultured_Geothrix_sp.）、未培養(yǎng)黃單胞菌（uncultured_Xanthomonadales_bacterium）、酸桿菌（Acidobacter ia_bacterium）、嗜水氣單胞菌（Aeromonas_hydrophila）、固氮弓菌屬（Azonexus_sp.）、嗜鹽

5、單胞菌屬（Candidatus_Halomonas）、微絲菌屬（Candidatus_Microt hrix）、綠彎菌門（Chloroflexi_bacterium）、黃色桿菌屬（Flavobacterium_cauens e）、黃桿菌屬（Flavobacterium_sp.）、出芽菌屬（Gemmata_sp.）、棉子糖乳球菌(Lactococcus_raffinolactis)、甲基彎曲菌屬(Methylosinus_sp.)、亞硝化

6、單胞菌屬(N itrosomonas_oligotropha)、終極腐霉菌(Pythium_ultimum)、光合細(xì)菌嗜酸柏拉紅菌(R hodoblastus_acidophilus)、α-變形菌綱(alpha_proteobacterium)、絲狀細(xì)菌(filamento us_bacterium)、γ-變形菌（gamma_proteobacterium）等。
　　（4）MBR反應(yīng)器接種期和穩(wěn)定運(yùn)行期的微生物種類豐富，微生物多樣

7、性相似水平為0.97：相似指數(shù)分析：OUT（Operational Taxonomic Units，是在系統(tǒng)發(fā)生學(xué)研究或群體遺傳學(xué)研究中，為了便于進(jìn)行分析，人為給某一個分類單元（品系，種，屬，分組等）設(shè)置的同一標(biāo)志）為345，ace（用來估計群落中含有OTU數(shù)目的指數(shù)）為1249，chao（是用chao1算法估計群落中含OTU數(shù)目的指數(shù)）為782，Shannon（用來估算樣品中微生物的多樣性指數(shù)之一）為3.05，Simpson（用來估算

8、樣品中微生物的多樣性指數(shù)之一）為0.1661。
　?。?）使用16S rDNA序列分析鑒定從MBR反應(yīng)器中分離的菌株，鑒定出了9種(屬)細(xì)菌：假單胞菌(Pseudomonassp.)、土生拉烏爾菌（Raoultella terrigena）、乙酰微小桿菌（Exiguobacterium acetylicum）解鳥氨酸克雷伯菌（Klebsiella ornithinolytica）、克雷伯氏桿菌（Klebsiella sp.）路德維

9、希腸桿菌（Enterobacter ludwigii）、魏氏原壁菌（Prototheca wickerhamii）、植生拉烏爾菌（Raoultella planticola）、節(jié)桿菌（arthrobacter sp.）、煙草節(jié)桿菌（Arthrobacter nicotianae）。
　?。?）MBR中存在著較多不可培養(yǎng)的微生物，已被分離并鑒定的微生物僅占一少部分。
　?。?）從MBR反應(yīng)器中分離純化、篩選出一株好氧反硝化菌,