高效液相常見(jiàn)問(wèn)題及解決

1、高效液相色譜儀使用中常見(jiàn)問(wèn)題及解決方法高效液相色譜儀使用中常見(jiàn)問(wèn)題及解決方法?高效液相色譜儀系統(tǒng)高效液相色譜儀系統(tǒng)液相色譜儀主要由貯液瓶、泵、進(jìn)樣器、柱子、柱溫箱、檢測(cè)器、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成。對(duì)于整個(gè)系統(tǒng)而言，柱子、泵和檢測(cè)器是核心部件同時(shí)也是易出問(wèn)題的主要部位。?常見(jiàn)問(wèn)題及解決方法常見(jiàn)問(wèn)題及解決方法高效液相作為一種高精密儀器，如果在使用過(guò)程中不按照正確操作的話，就容易導(dǎo)致一些問(wèn)題。其中最常見(jiàn)的就是柱壓?jiǎn)栴}、漂移問(wèn)題、峰型異常問(wèn)題。1柱壓

2、問(wèn)題柱壓?jiǎn)栴}柱壓?jiǎn)栴}是使用高效液相色譜過(guò)程中需要密切注意的地方，柱壓的穩(wěn)定與色譜圖峰形的好壞、柱效、分離效果及保留時(shí)間等密切相關(guān)。所謂柱壓穩(wěn)定并不是指壓力值穩(wěn)定于一個(gè)恒定值而是指壓力波動(dòng)范圍在345kPa以內(nèi)或在50PSI（針對(duì)Waters高效液相色譜儀）之間（在使用梯度洗脫時(shí)，柱壓平穩(wěn)緩慢的變化是允許的）。壓力過(guò)高、過(guò)低都屬于柱壓?jiǎn)栴}。1.1壓力過(guò)高壓力過(guò)高這是高效液相在使用中最常見(jiàn)的問(wèn)題，指的是壓力突然升高，1、一般都是由于流路中有

3、堵塞的原因。此時(shí)，我們應(yīng)該分段進(jìn)行檢查。(1).首先斷開(kāi)真空泵的入口處，此時(shí)PEEK管里充滿液體，使PEEK管低于溶劑瓶，看液體是否自由滴下，如果液體不滴或緩慢滴下，則是溶劑過(guò)濾頭堵塞。處理方法：用30%的硝酸浸泡半個(gè)小時(shí)，在用超純水沖洗干凈。如果液體自由滴下，溶劑過(guò)濾頭正常，在檢查；(2).打開(kāi)Purge閥，使流動(dòng)相不經(jīng)過(guò)柱子，如果壓力沒(méi)有明顯下降，則是過(guò)濾白頭堵塞。處理方法：將過(guò)濾白頭取出，用10%的異丙醇超聲半個(gè)小時(shí)。如果壓力降至

4、100PSI以下，過(guò)濾白頭正常，在檢查；(3).把色譜柱出口端取下，如果壓力不下降，則是柱子堵塞。處理方法：如果是緩沖鹽堵塞，則用95%的水沖至壓力正常。如果是一些強(qiáng)保留的物質(zhì)導(dǎo)致堵塞，則要用比現(xiàn)在流動(dòng)相更強(qiáng)的流動(dòng)相沖至壓力正常。假如按上面的方法長(zhǎng)時(shí)間沖洗壓力都不下降，則可考慮將柱子的進(jìn)出口反過(guò)來(lái)接在儀器上，用流動(dòng)相沖洗柱子。這時(shí)，如果柱壓仍不下降，只有換柱子入口篩板，但一旦操作不甚，很容易造成柱效下降，所以盡量少用。問(wèn)題無(wú)法解決可考慮

5、更換色譜柱。2、流速設(shè)定不正確：可重新設(shè)定正確流量。3、流動(dòng)相配比不正確：不同配比的流動(dòng)相其黏度系數(shù)不相同，較高黏度的流動(dòng)相相應(yīng)的系統(tǒng)壓力也大，如果可能可更換黏度較小的溶劑或重新設(shè)定配比。4、系統(tǒng)壓力零點(diǎn)漂移：調(diào)節(jié)壓力傳感器的零點(diǎn)。5、阻尼器堵塞：拆下后進(jìn)行超聲波清洗或更換新的阻尼器。6、進(jìn)樣器堵塞：參見(jiàn)說(shuō)明書清洗。動(dòng)相。2.22.2基線噪音基線噪音對(duì)于紫外檢測(cè)器氘燈光源打開(kāi)后要預(yù)熱30min以上基線才能穩(wěn)定。噪聲是指與被測(cè)物無(wú)關(guān)的檢測(cè)

6、器輸出信號(hào)的隨機(jī)擾動(dòng)變化分短期噪聲和長(zhǎng)期噪聲兩種。氘燈用的過(guò)久接近壽命期時(shí)(氘燈的壽命約1000h)會(huì)使基線噪音明顯增加應(yīng)及時(shí)更換氘燈。除光源外流路中的氣泡也會(huì)產(chǎn)生噪音。對(duì)于判斷基線噪聲增大是由于光源燈的老化還是來(lái)自流路中的氣泡的問(wèn)題可將泵關(guān)上繼續(xù)走基線如果噪聲立即停止基線呈一條直線說(shuō)明基線噪聲來(lái)自流動(dòng)相中的氣泡應(yīng)設(shè)法排氣若停泵后仍有噪音出現(xiàn)應(yīng)考慮是燈的問(wèn)題。電化學(xué)檢測(cè)器中的工作電極(安培型)對(duì)氣泡十分敏感儀器的平衡時(shí)間較長(zhǎng)。流路中如果

7、有氣泡存在不僅基線會(huì)出現(xiàn)尖峰還會(huì)影響檢測(cè)。因此做電化學(xué)檢測(cè)時(shí)流動(dòng)相的配制要很嚴(yán)格水要超純、除還原物配好后一定要過(guò)濾脫氣還應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配。如果泵系統(tǒng)不是PK材料即電化學(xué)分析專用儀器而是普通的高效液相色譜不銹鋼泵應(yīng)對(duì)系統(tǒng)中的不銹鋼材料的輸液泵、進(jìn)樣器和管道在分析前用6molL1硝酸溶液鈍化(注意斷開(kāi)分離柱)可縮短基線平衡時(shí)間。還可在流動(dòng)相中加入EDTA離子隱蔽劑也是可以的。如果有較大的氣泡進(jìn)到檢測(cè)器中光靠泵沖可能太慢可暫時(shí)將泵停止關(guān)上電化學(xué)檢測(cè)

8、器拆下工作電極用超純水沖洗電極表面也很奏效的但對(duì)液相色譜技術(shù)不太熟練的技術(shù)員要小心操作不宜反復(fù)這樣拆卸。2.2.12.2.1基線噪音基線噪音(規(guī)則的規(guī)則的)產(chǎn)生基線噪音的原因有：在流動(dòng)相、檢測(cè)器或泵中有空氣；漏液；流動(dòng)相混合不完全；溫度影響(柱溫過(guò)高檢測(cè)器未加熱)；在同一條線上有其他電子設(shè)備；泵振動(dòng)。了避免基線噪音在正式進(jìn)樣之前需要對(duì)流動(dòng)相脫氣；沖洗系統(tǒng)以除去檢測(cè)器或泵中的空氣；檢查管路接頭是否松動(dòng)；泵是否漏液；是否有鹽析出和不正常的噪

9、音如有必要更換泵密封；用手搖動(dòng)使溶劑混合均勻或使用低粘度的溶劑減少差異或加上熱交換器；有其他電子設(shè)備時(shí)斷開(kāi)LC、檢測(cè)器和記錄儀檢查干擾是否來(lái)自于外部加以更正；泵振動(dòng)時(shí)在系統(tǒng)中加入脈沖阻尼器。2.2.22.2.2基線噪音基線噪音(不規(guī)則的不規(guī)則的)(1)漏液：檢查接頭是否松動(dòng)泵是否漏液是否有鹽析出和不正常的噪音。如有必要更換密封檢查流通池是否漏液。(2)流動(dòng)相污染、變質(zhì)或由低質(zhì)溶劑配成：檢查流動(dòng)相的組成。(3)流動(dòng)相各溶劑不相溶：選擇互溶

10、的流動(dòng)相。(4)檢測(cè)器記錄儀電子元件的問(wèn)題：斷開(kāi)檢測(cè)器和記錄儀的電源檢查并更正。(5)系統(tǒng)內(nèi)有氣泡：用強(qiáng)極性溶液清洗系統(tǒng)；檢測(cè)器內(nèi)有氣泡清洗檢測(cè)器在檢測(cè)器后面安裝背景壓力調(diào)節(jié)器。(6)流通池污染(即使是極少的污染物也會(huì)產(chǎn)生噪音):用硝酸清洗流通池(7)檢測(cè)器燈能量時(shí)不足更換燈(8)色譜柱填料流失或阻塞:更換色譜柱。(9)流動(dòng)相混合不均勻或混合器工作不正常:維修或更換混合器在流動(dòng)相不走梯度時(shí)不建議使用泵的混合裝置。3保留時(shí)間保留時(shí)間3.1