微波輔助提取-高效液相色譜法測定蔬果中的vc含量

1、微波輔助提取高效液相色譜法測定蔬果中的Vc含量1微波輔助提取微波輔助提取高效液相色譜法高效液相色譜法測定蔬果中的維生素測定蔬果中的維生素C含量含量化學(xué)與化學(xué)工程學(xué)院中心實(shí)驗(yàn)室中山大學(xué)分析科學(xué)研究所，廣東510275通訊作者，Email:Bgalang@摘要摘要本實(shí)驗(yàn)用微波輔助提取三種不同水果中的維生素C，采用高效液相色譜法通過標(biāo)準(zhǔn)曲線定量法，借助紫外可見光分析，在265nm的波長下測定維生素C的吸光度，與標(biāo)準(zhǔn)系列比較，以保留時(shí)間來定性、

2、峰面積定量。實(shí)驗(yàn)測得：在5100mgL范圍內(nèi)，維生素C濃度與峰面積具有很好的線性關(guān)系（A=32074c（mgL）34595，R2=0.9999）本實(shí)驗(yàn)測得每100g橘子、金桔、蘋果中的維生素C含量分別為：29.73mg100g、33.66mg100g、2.24mg100g。該操作方法簡單方便，靈敏迅速，準(zhǔn)確度比較好。關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞維生素C微波輔助提取高效液相色譜標(biāo)準(zhǔn)曲線1引言引言維生素C，又叫L抗壞血酸，化學(xué)式C6H8O6，是一種水溶性維

3、生素。食物中的維生素C被人體小腸上段吸收，一旦吸收，就分布到體內(nèi)所有的水溶性結(jié)構(gòu)中。正常成人體內(nèi)的維生素C代謝活性池中約有1500mg維生素C，最高儲(chǔ)存峰值為3000mg。正常情況下，維生素C絕大部分在體內(nèi)經(jīng)代謝分解成草酸或與硫酸結(jié)合生成抗壞血酸2硫酸由尿排出；另一部分可直接由尿排出體外。（摘自:baike.view245497.htm）維生素C的主要作用是提高免疫力，預(yù)防癌癥、心臟病、中風(fēng)，保護(hù)牙齒和牙齦等。另外，堅(jiān)持按時(shí)服用維生素C

4、還可以使皮膚黑色素沉著減少，從而減少黑斑和雀斑，使皮膚白皙。富含維生素C的食物有花菜、青辣椒、橙子、葡萄汁、西紅柿等，可以說，在所有的蔬菜、水果中，維生素C含量都不少。美國專家認(rèn)為，每人每天維生素C的最佳用量應(yīng)為200～300毫克，最低不少于60毫克，半杯（大約一百毫升）新鮮橙汁便可滿足這個(gè)最低量。而中國營養(yǎng)學(xué)會(huì)建議的膳食參考攝入量（RNI），成年人為100mg日，可耐受最高攝入量（UL）為1000mg日。微波輔助提取高效液相色譜法測定

5、蔬果中的Vc含量3分析中的樣品預(yù)處理[5]即微波輔助萃取。十幾年來，MAE技術(shù)在有機(jī)分析中得到了廣泛的應(yīng)用。本實(shí)驗(yàn)采用MAE技術(shù)來萃取水果中的維生素C。MAE是指利用微波能強(qiáng)化溶劑萃取效率，即利用微波加熱來加速溶劑對(duì)固體樣品中目標(biāo)萃取物(主要是有機(jī)化合物)的萃取過程。微波具有波動(dòng)性、高頻特性以及熱特性或非熱特性(生物效應(yīng))等特點(diǎn)[5]。MAE具有以下優(yōu)點(diǎn)：1、快速高效：樣品及溶劑中的偶極分子在高頻微波能的作用下，以109s圈的速度變換其

6、正、負(fù)極，產(chǎn)生偶極渦流、離子傳導(dǎo)和高頻率摩擦，從而在短時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生大量的熱量。偶極分子旋轉(zhuǎn)導(dǎo)致的弱氫鍵破裂、離子遷移等加速了溶劑分子對(duì)樣品基體的滲透，待分析成分很快溶劑化，使微波萃取時(shí)間顯著縮短。2、加熱均勻：微波加熱是透入物料內(nèi)部的能量被物料吸收轉(zhuǎn)換成熱能對(duì)物料加熱，形成獨(dú)特的物料受熱方式，整個(gè)物料被加熱，無溫度梯度，即微波加熱具有均勻性的優(yōu)點(diǎn)。3、微波加熱具有選擇性：微波對(duì)介電性質(zhì)不同的物料呈現(xiàn)出選擇性的加熱特點(diǎn)，介電常數(shù)及介質(zhì)損耗小

7、的物料，對(duì)微波的入射可以說是“透明”的。溶質(zhì)和溶劑的極性越大，對(duì)微波能的吸收越大，升溫越快，促進(jìn)了萃取速度。而對(duì)于不吸收微波的非極性溶劑，微波幾乎不起加熱作用。所以，在選擇萃取劑時(shí)一定要考慮到溶劑的極性，以達(dá)到最佳效果。4、生物效應(yīng)（非熱效應(yīng))：由于大多數(shù)生物體內(nèi)含有極性水分子，在微波場的作用下引起強(qiáng)烈的極性震蕩，從而導(dǎo)致細(xì)胞分子間氫鍵松弛，細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)電擊穿破裂，加速了溶劑分子對(duì)基體的滲透和待提取成分的溶劑化。因此，利用MAE從生物基體

8、萃取待分析的成分時(shí)，能提高萃取效率。高效液相色譜法（HighPerfmanceLiquidChromatographyHPLC）又稱“高壓液相色譜”、“高速液相色譜”、“高分離度液相色譜”、“近代柱色譜”等。高效液相色譜是色譜法的一個(gè)重要分支，以液體為流動(dòng)相，采用高壓輸液系統(tǒng)，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動(dòng)相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內(nèi)各成分被分離后，進(jìn)入檢測器進(jìn)行檢測，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)試樣的分析。該方法已成為化