生物化學實驗

1、生物化學實驗生物化學實驗一、一、糖的顏色反應及還原作用糖的顏色反應及還原作用實驗一：糖的顏色反應實驗一：糖的顏色反應實驗1.1莫氏實驗一、目的掌握莫氏（molisch）實驗鑒定糖的原理和方法。二、原理糖經(jīng)濃無機酸（濃硫酸、濃鹽酸）脫水產(chǎn)生糠醛或糠醛衍生物，后者在濃無機酸作用下，能與α萘酚生成紫紅色縮合物，在糖液和濃硫酸的液面間形成紫環(huán)，因此又稱“紫環(huán)反應”，其反應如下圖：利用這一性質(zhì)可以鑒定糖。三、實驗器材1、棉花或濾紙。2、吸管1.0

2、ml(4)、2.0ml(1)。3、試管1.515cm(4)。四、實驗試劑1、莫氏試劑：稱取α萘酚5g，溶于95%乙醇并稀釋至100ml。此試劑需新鮮配置，并貯于棕色試劑瓶中。2、1%蔗糖溶液：稱取蔗糖1g，溶于蒸餾水并定容至100ml。3、1%葡萄糖溶液：稱取葡萄糖1g，溶于蒸餾水并定容至100ml.4、1%淀粉溶液：講1g可溶性淀粉與少量冷蒸餾水混合溶液合成薄漿狀物，然后緩緩傾入沸蒸餾水中，邊加邊攪。最后以沸蒸餾水稀釋至100ml。五

3、、操作于4支試管中，分別加入1ml1%葡萄糖溶液、1%蔗糖溶液、1%淀粉溶液和少許纖維素（棉花或濾紙浸在1ml水中）。然后各加莫氏試劑2滴1，搖勻，講試管傾斜，沿管壁慢慢加入濃硫酸1.5ml(切勿振搖！)硫酸層沉于試管底部與糖溶液分成兩層，觀察液面交界處有無紫色環(huán)出現(xiàn)。六、注意事項1、試管中加入各種糖后，應做好標記，濃硫酸加入的方式應保持一致。2、莫氏反應非常靈敏，所用的試劑應洗凈，不可再樣品中混入紙屑等雜物。3、當糖濃度過高時，由于濃

4、硫酸對他的焦化作用，將呈現(xiàn)紅色及褐色而不呈現(xiàn)紫色，需稀釋后再做。思考題：1、解釋α苯酚反應的原理。2、用莫氏試驗鑒定糖時需注意哪些？試驗1.2塞氏試驗一、目的掌握塞氏（Seliwanoff）實驗鑒定酮糖的原理和方法。于三支試管中加入杜氏試劑1ml，再分別加入1滴1%葡萄糖溶液、1%半乳糖溶液和1%阿拉伯糖溶液，搖勻。將試管同時加入沸水浴中，觀察顏色變化，并記錄顏色變化的時間。六注意事項1、試管中加入各種糖后，應做好標記，并按順序置于沸水

5、浴鍋中。2、實驗過程中，要仔細觀察溶液顏色的變化情況。思考題1、在Tollen反應分析位置樣品時，應注意些什么問題？2、列表總結(jié)和比較本實驗三種顏色反應的原理及其應用。二、二、多糖的性質(zhì)多糖的性質(zhì)多糖的實驗多糖的實驗一、目的1、熟悉淀粉多糖的碘實驗反應原理和方法。2、進一步了解淀粉的水解過程。二、原理淀粉分布于植物界，谷、果實、種子、塊莖中含量豐富，工業(yè)用的淀粉主要來源于玉米、山芋、馬鈴薯。本實驗以馬鈴薯為原料，利用淀粉不溶于或難溶于水

6、的的性質(zhì)來制備淀粉。淀粉遇碘呈藍色1，是由于碘被吸附在淀粉上，形成一復合物，此復合物不穩(wěn)定，極易被醇、氫氧化鈉和加熱等使顏色褪去，其他多糖大多數(shù)能與碘呈特異的顏色，此類呈顏色物質(zhì)也不穩(wěn)定。淀粉在酸催化下加熱，逐步水解成分子較小的糖、最后水解成葡萄糖，（C6H10O5）（C4H10O5）C17H22O11C4H12O4淀粉各種糊精麥芽糖葡萄糖淀粉完全水解后，失去與碘的作用，同時出現(xiàn)單糖的還原性。三、實驗器材1、馬鈴薯3、布氏漏斗（1）、抽

7、濾瓶500ml（1）2、紗布、研缽（1）4、表面皿10cm（1）、白瓷板、皮頭滴管5、試管1.5cm15cm(4)8、量筒25ml（1）6、電爐、石棉網(wǎng)9、吸管1.0ml(1)7、燒杯50ml（1）10、木質(zhì)試管四、實驗試劑1、稀釋液：配制2%碘化鉀溶液，加入適量碘，使溶液呈淡棕黃色即可。2、0.1%淀粉：稱取淀粉1g，加少量水，調(diào)勻，傾入沸水，邊加邊攪，并以熱水稀釋至1000ml，可加數(shù)滴甲苯防腐。3、10%NaOH溶液:稱取NaOH