《生物化學》考研復習重點大題

1、中國農(nóng)業(yè)大學研究生入學考試復習資料《生物化學》重點大題1簡述gaff定律的主要內容。答案：(1）不同物種生物的DNA堿基組成不同，而同一生物不同組織、器官的DNA堿基組成相同。(2）在一個生物個體中，DNA的堿基組成并不隨年齡、營養(yǎng)狀況和環(huán)境變化而改變。(3）幾乎所有生物的DNA中，嘌呤堿基的總分子數(shù)等于嘧啶堿基的總分子數(shù)，腺嘌呤(A)和胸腺嘧啶(T)的分子數(shù)量相等，鳥嘌呤(G)和胞嘧啶(C)的分子數(shù)量相等，即A＋G=T＋C。這些重要的

2、結論統(tǒng)稱為gaff定律或堿基當量定律。2簡述DNA右手雙螺旋結構模型的主要內容。答案：DNA右手雙螺旋結構模型的主要特點如下：(1）DNA雙螺旋由兩條反向平行的多核苷酸鏈構成，一條鏈的走向為5′→3′，另一條鏈的走向為3′→5′兩條鏈繞同一中心軸一圈一圈上升，呈右手雙螺旋。(2）由脫氧核糖和磷酸構成的骨架位于螺旋外側，而堿基位于螺旋內側。(3）兩條鏈間A與T或C與G配對形成堿基對平面，堿基對平面與螺旋的虛擬中心軸垂直。(4）雙螺旋每旋轉

3、一圈上升的垂直高度為3.4nm(即34），需要10個堿基對，螺旋直徑是2.0nm。(5）雙螺旋表面有兩條深淺不同的凹溝，分別稱為大溝和小溝。3簡述DNA的三級結構。答案：在原核生物中，共價閉合的環(huán)狀雙螺旋DNA分子，可再次旋轉形成超螺旋，而且天然DNA中多為負超螺旋。真核生物線粒體、葉綠體DNA也是環(huán)形分子，能形成超螺旋結構。真核細胞核內染色體是DNA高級結構的主要表現(xiàn)形式，由組蛋白H2A、H2B、H3、H4各兩分子形成組蛋白八聚體，D

4、NA雙螺旋纏繞其上構成核小體，核小體再經(jīng)多步旋轉折疊形成棒狀染色體，存在于細胞核中。4簡述tRNA的二級結構與功能的關系。答案：已知的tRNA都呈現(xiàn)三葉草形的二級結構，基本特征如下：(1）氨基酸臂，由7bp組成，3′末端有CCAOH結構，與氨基酸在此縮合成氨基酰tRNA，起到轉運氨基酸的作用(2）二氫尿嘧啶環(huán)(DHU、I環(huán)或D環(huán)），由8～12個核苷酸組成，以含有5，6二氫尿嘧啶為特征(3）反密碼環(huán)，其環(huán)中部的三個堿基可與mRNA的三聯(lián)體

5、密碼子互補配對，在蛋白質合成過程中可把正確的氨基酸引入合成位點(4)額外環(huán)，也叫可變環(huán)，通常由3～21個核苷酸組成(5)TψC環(huán)，由7個核苷酸組成環(huán)，和tRNA與核糖體的結合有關。5簡述真核生物mRNA3′端polyA尾巴的作用。答案：真核生物mRNA的3′端有一段多聚腺苷酸(即polyA)尾巴，長約20～300個腺苷酸。該尾巴與mRNA由細胞核向細胞質的移動有關，也與mRNA的半衰期有關研究發(fā)現(xiàn)，polyA的長短與mRNA壽命呈正相關

6、，剛合成的mRNA壽命較長，“老”的mRNA壽命較短。6簡述分子雜交的概念及應用。答案：把不同來源的DNA(RNA）鏈放在同一溶液中進行熱變性處理，退火時，它們之間某些序列互補的區(qū)域可以通過氫鍵重新形成局部的DNADNA或DNARNA雙鏈，這一過程稱為分子雜交，生成的雙鏈稱雜合雙鏈。DNA與DNA的雜交叫做Southern雜交，DNA與RNA雜交叫做Nthern雜交。核酸雜交已被廣泛應用于遺傳病的產(chǎn)前診斷、致癌病原體的檢測、癌基因的檢測

7、和診斷、親子鑒定和動或酶處在活性狀態(tài)。此外，GSH的巰基還有嗜核特性，能與外源的嗜電子毒物如致癌劑或藥物等結合，從而阻斷這些化合物與機體DNA、RNA或蛋白質結合，以保護機體免遭毒物損害。13.簡述蛋白質變性與沉淀的關系。答案：蛋白質沉淀和變性的概念是不同的。沉淀是指在某些因素的影響下，蛋白質從溶液中析出的現(xiàn)象而變性是指在變性因素的作用下蛋白質的空間結構被破壞，生物活性喪失，理化性質發(fā)生改變。變性的蛋白質溶解度明顯降低，易結絮、凝固而沉

8、淀但是沉淀的蛋白質卻不一定變性，如加熱引起的蛋白質沉淀是由于蛋白質熱變性所致，而硫酸銨鹽析所得蛋白質沉淀一般不會變性。14.概述蛋白質一級結構測定的一般程序。答案：蛋白質一級結構測定的一般程序為：①測定蛋白質(要求純度必須達到97%以上）的相對分子質量和它的氨基酸組成，推測所含氨基酸的大致數(shù)目。②測定多肽鏈N末端和C末端的氨基酸，從而確定蛋白質分子中多肽鏈的數(shù)目。然后通過對二硫鍵的測定，查明蛋白質分子中二硫鍵的有無及數(shù)目。如果蛋白質分子

9、中多肽鏈之間含有二硫鍵，則必須拆開二硫鍵，并對不同的多肽鏈進行分離提純。③用裂解點不同的兩種裂解方法(如胰蛋白酶裂解法和溴化氰裂解法)分別將很長的多肽鏈裂解成兩套較短的肽段。④分離提純所產(chǎn)生的肽段，用蛋白質序列儀分別測定它們的氨基酸序列。⑤應用肽段序列重疊法確定各種肽段在多肽鏈中的排列次序，即確定多肽鏈中氨基酸排列順序。⑥如果有二硫鍵，需要確定其在多肽鏈中的位置。15.試論蛋白質一級結構與空間結構的關系。答案：①以RNA酶變性與復性實驗

10、、有活性牛胰島素的人工合成為例證實蛋白質一級結構決定其空間結構。②Anfinsen發(fā)現(xiàn)蛋白質二硫鍵異構酶(PDI）能加速蛋白質正確二硫鍵的形成如RNA酶復性的過程是十分緩慢的，有時需要幾個小時，而PDI在體外能幫助變性后的RNA酶在2min內復性。分子伴侶在細胞內能夠幫助新生肽鏈正確組裝成為成熟的蛋白質。由此可見，蛋白質空間結構的形成既決定于其一級結構，也與分子伴侶、蛋白質二硫鍵異構酶等助折疊蛋白的助折疊作用密不可分。16.概述凝膠過濾

11、法測蛋白質相對分子質量的原理。答案：層析過程中，混合樣品經(jīng)過凝膠層析柱時，各個組分是按分子量從大到小的順序依次被洗脫出來的并且蛋白質相對分子質量的對數(shù)和洗脫體積之間呈線性關系。因此，將幾種已知相對分子質量(應小于所用葡聚糖凝膠的排阻極限）的標準蛋白質混合溶液上柱洗脫，記錄各種標準蛋白質的洗脫體積然后，以每種蛋白質相對分子質量的對數(shù)為縱坐標，以相對應的洗脫體積為橫坐標，繪制標準曲線再將待測蛋白質溶液在上述相同的層析條件下上柱洗脫，記錄其洗