甘藍brassicaoleraceavar.capitata顯性雄性不育基因分子標記輔助育種研究

1、中國農(nóng)業(yè)科學院碩士學位論文甘藍（Brassica oleracea var.capitata）顯性雄性不育基因分子標記輔助育種研究姓名：黃和艷申請學位級別：碩士專業(yè)：蔬菜學指導教師：王曉武20050601A B S T R A C TC a b b a g e ( B r a s s i c ao l e r a c e a w a r ．c a p i t a t a ) i sa w o r l d w i d ev e g e t

2、 a b l ec r o pb e l o n g i n g t ot h eC r u c i f e r a ef a m i l y ．U t i l i z a t i o no fm a l e s t e r i l e l i n e s i s o fs i g n i f i c a n ti m p o r t a n c e f o rh y b r i d s e e d p r o d u c t i o

3、n ．Ad o m i n a n t m a l es t e r i l i t yg e n e ( ^ 厶) w a si d e n t i f i e df r o m a s p o n t a n e o u sm u t a t i o ni na s p r i n gc a b b a g e l i n e7 9 ·3 9 9 - 3 ．A s 齟s M sg e n e h a sb e e nu s

4、 e di nh y b r i d s e e dp r o d u c t i o n o f s e v e m lB r a s s i c a o l e r a c e ac u l f i v a r s ，t o 觸e ra c c e l e r a t e t h ea p p l i c a t i o no ft h i s m a l e s t e r i l i t y ，t h i s p r e s e

5、 n tr e s e a r c h a i m e dt oa d v a n c e f u r t h e r r e s e a r c h i nt h ea s p e c to f m o l e c u l a r t l a a l ' k e ra s s i s t e ds e l e c t i o n ．O n eo ft h em o s ti m p o r t a n tk e ys t e

6、p sf o rt h eu t i l i z a t i o n o f d o m i n a n tm a l e s 【e r i l i t y i nc a b b a g ei s t oi d e n t i f yp l a n t s w i m h o m o z y g o u sd o m i n a n tm a l es t e r i l i t yg e n o t y p e ．A F L Pt e

7、 c h n o l o g yw a sa p p l i e dt om a r k e r - a s s i s t e ds e l e c t i o n i n t w on e a r i s o g e n i c p o p u l a t i o n s ，0 3 A a n d0 3 B ．A f t e r s c r e e n i n g t h e i rc o r r e s p o n d i n g

8、 g e n o t y p e sM s M s ，M s m sa n d m s n l so f t h e t w os e t so f n e a r i s o g e n i cl i n e s ，w ed e v e l o p e d ，r e s p e c f i v et oe a c hl i n e ，t w os e t so fA F L Pm a r k e r s ( 5m a r k e r

9、s f o re a c h s e t ) w h i c hc a l l b eu s e d f o ri d e n t i f y i n gc a b b a g e p l a n t sw i 出h o m o z y g o u sd o m i n a n tm a l es t e r i l i t yg e n o t y p e 。T h e s em a r k e r sc a n b eu s e d

10、 t oi d e n t i f yh o m o z y g o u sd o m i n a n t m a l e s t e r i l i t yg e n o t y p eb y s e l e c t i n g p l a n t sw h i c h t h e m a r k e r s a r ea b s e n t ，a sa l l o f t h e ma r e l i n k e di nr e p

11、 u l s i o n t ot h ed o m i n a n tM s g e n e ．A m o n g t h e s eA F L Pm a r k e r s ，e 3 3 m 5 2 i s a p p l i c a b l e f o rs e l e c t i n gp l a n t sw i l l l h o m o z y g o u sd o m i n a n tm a l es t e r i

12、l i t yg e n el o c u si nb o t h0 3 Aa n d 0 3 B p o p u l a t i o n s ．U s i n g g e n o m i c P C R w a l k i n g ，e 3 3 m 5 2w a ss u c c e s s f u l l yc o n v e n e di n t oaS C A R ( S e q u e n c eC h a r a c t e

13、 r i z e dA m p l i f i e dR e g i o n ) m a r k e r ，w h i c hc a nb eu s e d d i r e c t l ya n d i sm u c hm o r ee f f i c i e n ti np r a c t i c a lu t i l i t y ．A sa 9g e n e r a t i o n sb a c k c m s s e d N I

14、L p o p u l a t i o nw i t h2 5 i n d i v i d u a l sh a sb e e nu s e d f o ri d e n t i f y i n gt h em a l - k e r , p r e d i c t e dp r e c i s i o n w a s 9 6 ％．I n t h e p r e s e n tr e s e a r c h ，p o l y m o r

15、 p h i s mw a s a n a l y z e di n6 4c a b b a g e a c c e s s i o n s b y u s i n gt h e5 A F L P m a r k e r s s e l e c t e df r o m0 3 B幻d e t e r m i n et h e p r a c t i c a ll i m i t a t i o no f e a c h m a r k

16、e r ．A F L Pt e c h n o l o g y w a sa p p l i e dt ot h ea n a l y s i so f a s e g r e g a t i n gB C 8 p o p u l a t i o n w i t h9 5 i n d i v i d u a l s ．I nt o t a l ，l 1 A F L P i ／l a r k e r s o u to f 5 1 2 p

17、r i m e rc o m b i n a t i o n s w e r ei d e n t i f i e d ，w h i c hw e F ee 3 6 m 7 3 ，e 3 5 m 8 0 ，e 3 6 m 7 5 ，e 3 2 m 6 7 ，e 3 8 m 5 5 ，e 3 2 m 7 1 ，e 3 7 m 3 1 ，e 3 7 m 7 5 ，e 3 6 m 5 8 ，c 3 7 m 7 2a n de 3 7 m 4

18、4 ．D e t e r m i n e d b yJ o i m n a p3 ．0 ，t h e s e m a r k e r s w e r e a l ll i n k e d t oM s l o c u sf r o mt h es a l n e s i d e ．A m o n gt h e s em a r k e r s ，e 3 6 m 7 3 ，t h e n e a r e s t o n e ，l o c

19、a t e d 1 c M f r o m 也e M s g e n e ，w h i l e ，e 3 7 m 4 4 ，t h em o s td i s t a n to n e ．w a s 2 1c Mf r o mt h eg e n e ．T h el a r g e s ti n t e r v a ld i s t a n c eb e t w e e nl i n k e dm a r k e r sw a s 7

20、( 7 ．7 0 ) c M ．a(chǎn) n d t h en e a r e s to i l ew a s l ( 0 ．5 6 2 ) c M ．A f t e ra n a l y z i n ga l lp o l y m o r p h i cm a r k e r s 。w eo b t a i n e d a l i n k a g eo f 6 m a r k e r s ，c o v e r i n g9c M ，w h

21、i c hw e r e n o t l i n k e dt ot h ed o m i n a n t m a l es t e r i l i t yg e n e ．T h i s c l e a r l y s u g g e s t s t h a te v e n i n t h ea d v a n c e db a e k c r o s sg e n e r a t i o n , s e l e c t i o n

22、 b yo n l yl r a d i t i o n a lm e t h o d s c a n n o t r e m o v e “ g e n e t i cc a r r y - o v e r “ ’．T h ed e t e c t i o n o f “g e n e t i c c a r l _ y - o v e r “ ’i n t h e B C 8s u g g e s t s t h a t m o l