不同生境下南極冰藻chlamydomonassp.icel不飽和脂肪酸的研究及脂肪酸去飽和酶的功能驗證

1、不同生境下南極冰藻C h l a m y d o m o n a ss p ．I C E ．L 不飽和脂肪酸的研究及脂肪酸去飽和酶的功能驗證學(xué)位論文完成日期指導(dǎo)教師簽字答辯委員會成員簽字盔選摘要不同生境下南極冰藻C h l a m y d o m o n a s s p ．I C E —L 不飽和脂肪酸的研究及脂肪酸去飽和酶的功能驗證摘要不飽和脂肪酸是重要的活性物質(zhì)，對生物膜結(jié)構(gòu)、通透性的調(diào)節(jié)有重要作用；并參與細(xì)胞生物化學(xué)反應(yīng)、轉(zhuǎn)運過程

2、、細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)和脂肪代謝等生理過程。南極冰藻C h l a m y d o m o n a s s p ．I C E ．L 中富含多不飽和脂肪酸，是南極地區(qū)的主要初級初級生產(chǎn)者。真核微藻不飽和脂肪酸合成途徑具有多樣性。一般存在兩條不飽和脂肪酸合成途徑，原核途徑和真核途徑。原核途徑位于葉綠體，真核途徑位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。所以，一般有分別位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和葉綠體的兩種類型脂肪酸去飽和酶。這些酶催化與載體結(jié)合的飽和或不飽和脂肪酸在脂肪酸鏈上形成新的雙鍵，是

3、催化不飽和脂肪酸合成的酶。合成不飽和脂肪酸的第一個關(guān)鍵酶一A 7 ／A 9 脂肪酸去飽和酶，是將飽和脂肪酸催化成不飽和脂肪酸的限速酶。A 1 2 脂肪酸去飽和酶，也稱∞6 脂肪酸去飽和酶，是向單不飽和脂肪酸中引入第二個雙鍵的關(guān)鍵酶。而其他的脂肪酸去飽和酶則進一步在脂肪酸鏈上形成新的雙鍵。本論文主要進行了以下研究內(nèi)容：對南極冰藻C h l a m y d o m o n a ss p 。I C E ．L 的脂肪酸去飽和酶基因進行了生物信息

4、學(xué)分析；克隆了南極冰藻C h l a m y d o m o n a s s p ．I C E —L 不飽和脂肪酸合成途徑中的A 9 C i F A D ，A 1 2 C i F A D , A 6 C i F A D , o D 3 C i F A D l a n dc 0 3 C i F A D 2 去飽和酶基因，并對A 1 2 C i F A D 基因的功能進行了研究。序列比對結(jié)果顯示來自南極冰藻C h l a m y d o m

5、 o n a ss p ．I C E ．L 的脂肪酸去飽和酶與已知的脂肪酸去飽和酶的保守組氨酸簇一致。為驗證A 1 2 C i F A D 的功能，在聚球藻和酵母中進行體外表達(dá)。在含有南極冰藻C h l a m y d o m o n a s s p ．I C E —L A 1 2 C i F A D 基因的重組子聚球藻誘導(dǎo)表達(dá)檢測到了新脂肪酸C 1 8 ：2 ，但是在釀酒酵母中的誘導(dǎo)表達(dá)沒有發(fā)現(xiàn)新脂肪酸。環(huán)境因素( 如溫度、鹽度等)