錦橙(citrussinensisosbeckcv.jincheng)種子球蛋白基因啟動(dòng)子的克隆及在轉(zhuǎn)基因煙草中的功能分析

1、西南師范大學(xué)碩士學(xué)位論文錦橙(Citrus sinensis Osbeck cv.Jincheng)種子球蛋白基因啟動(dòng)子的克隆及在轉(zhuǎn)基因煙草中的功能分析姓名：霍靜申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：植物學(xué)指導(dǎo)教師：高峰;林忠平20040601A b s t r a c tC l o n i n g o f t h eS e e d G l o b u l i n G e n e P r o m o t e rf r o m C i t r u s

2、s i n e n s i sO s b e c k C V ．J i n c h e n ga n d A n a l y s i si n T r a n s g e n i c T o b a c c oM a j o r ：B o t a n y S p e c i a l i t y ：P l a n t M o l e c u l a r B i o l o g yT u t o r ：P r o f ．F e n gG a

3、 o P o s t g r a d u a t e ：J i n gH u o ( 2 0 0 0 2 5 6 )P r o f ．Z h o n g p i n g L i nA b s t r a c tS e e d l e s s c h a r a c t e rh a s a n i m p o r t a n t v a l u e i n c i t r u s b r e e d i n g f o r f r e

4、s h f r u i t a n dp r o c e s s i n g ．C h i n a i sv e r yr i c hi nr e s o u r c eo f c i t r u sf n t i t sa n dt h e r e a r em a n y l o c a lv a r i e t i e sH o w e v e r , m a n y c u l t i v a r si n c i t r u

5、sf r u i t sp r o d u c en u m e r o u s s e e d s ，w h i c hi sd i s a d v a n t a g ef o ro r a n g e c o m m e r c i a lv a l u e a n d f o r c o m p e t i t i o n i nt h e i n t e r n a t i o n a lm a r k e t ．I nt h

6、 i ss t u d y , t h ep r o m o t e ro f t h es e e dg l o b u l i ng e n e ( e i t r i ng e n e ) f r o m C i t r u s s i n e n s i sC V ．J i n c h e n gW a S o b t a i n e d 。T od e f i n et h e f u n c t i o no f p r o

7、 m o t e r , a s e to fv e c t o r s c o m a i n i n gd i f f e r e n td e l e t e ds e q u e n c e so f t h ec i t r i n p r o m o t e rw e r e c o n s t r u c t e d ．T h ep r o m o t e rc a nb eu s e df o r a r t i f i

8、 c i a l i n t e r v e n t i o n a n d b l o c k i n go f t h ee m b r y o d e v e l o p m e n t 。B y u s i n g t h et o t a lD N A o f t h eC i t r u ss i n e n s i s O s b e e k C V ．J i n c h e n ga st e m p l a t e ．

9、a n db yu s i n g t h e c l l r o m o s o m e w a l k m gt e c h n o l o g y w i t h l i n k e r , t o g e t h e rw i t h t h ef e a t u r e o fn e s t e d - P C R , t o u c h d o w n —P C ＆h o t —s t a r tP C R a n dt w

10、 os t a g e sP C R ，2 0 5 4 b pf r a g m e n tW a Sc l o n e d ，w h i c h c o n t a i n e da p a r t i a ls e q u e n c e ，o ft h e o r a n g e s e e d s g l o b i n s g e n e a n di t s5 “ - u p s t r e a mr e g u l a t

11、 o r ys e q u e n c e a n d w a S c a l l e d ‘‘s s p ”I t w a sd e m o n s t r a t e db yp l a n tC A R E a n a l y s i st h a t5 ’- u p s t r e a ms e q u e n c ef r o mA T G h a dt h ef e a t u r eo f p r o m o t e r

12、：T A T A —b o xa n d C A A T - b o xi n v o l v e d i n t h et r a n s c r i t ：I t i o n a I s t a r ta n dt h e t r a n s l a t i o n r e s p e c t i v e l y , a n d o t h e r r e g u l a t o r y s e q u e n c e r e l