微囊藻毒素對小鼠肝毒性和抗氧化系統(tǒng)的影響.pdf

1、本文主要研究了經(jīng)腹腔注射和口服染毒微囊藻毒素對小鼠的亞慢性肝毒性和對小鼠抗氧化系統(tǒng)的影響。 實驗所用微囊藻采自河南省南灣水庫，水樣鏡檢結果表明，南灣水庫微囊藻的主要種類為銅綠微囊藻，用MA培養(yǎng)基進行大量培養(yǎng)；采用水浴法提取獲得微囊藻細胞抽提物，經(jīng)HPLC分析，細胞抽提物中微囊藻毒素的總含量為1.581μg/mg干重培養(yǎng)物，其中微囊藻毒素LR的含量為1.51μg/mg干重培養(yǎng)物，微囊藻毒素YR含量為0.008μg/mg干重培養(yǎng)物。

2、24小時急性毒性實驗結果表明，微囊藻細胞抽提物對小鼠腹腔注射的LD50為33.34μgMCs/kg，灌胃口服染毒的LD50為1.8815mgMCs/kg。 首先研究了低劑量微囊藻毒素的亞慢性肝毒性。將昆明雄性小鼠隨機分為4組，每組5只(3個處理組和1個對照組)，設一個重復。處理組每天分別經(jīng)腹腔注射單位體重微囊藻毒素3.33，4.76，6.67μg/kg，對照組注射等量生理鹽水，連續(xù)注射四周。取材后觀察小鼠血清乳酸脫氫酶、谷丙轉氨

3、酶和堿性磷酸酶活性和肝臟病理學變化。結果表明乳酸脫氫酶和谷丙轉氨酶在3.33μgMCs/kg出現(xiàn)了統(tǒng)計學上的升高，在4.76，6.67μgMCs/kg劑量下更為明顯。堿性磷酸酶在低劑量(3.33μgMCs/kg)下沒有改變，在中劑量(4.76μgMCs/kg)和高劑量下(6.67μgMCs/kg)時才出現(xiàn)顯著增加。處理組的小鼠肝臟組織出現(xiàn)了病理損傷，低劑量組的癥狀主要是細胞連接變得疏松，中劑量組還出現(xiàn)Kuffer細胞和嗜堿性細胞增多，高

4、劑量組變形細胞、凋亡細胞增多，同時還發(fā)現(xiàn)了組織出血。這一結果表明，血清酶的變化和肝損傷的程度有相關性，人們可以把檢測血清酶活性的變化作用檢測微囊藻毒素是否對人體肝臟造成損害的一個輔助指標。 在研究腹腔注射對小鼠亞慢性肝毒性的同時，還采用灌胃法研究了微囊藻毒素亞慢性染毒對小鼠抗氧化防御系統(tǒng)的影響。將雄性昆明小鼠隨機分為2組，每組20只(1個處理組和1個對照組)，設一個重復。處理組每天通過灌胃口服暴露210μg/kg微囊藻毒素(大約

5、為LD50的1/10)，對照組灌等量的生理鹽水。結果表明，谷胱甘肽含量從第二周開始出現(xiàn)明顯下降。谷胱甘肽硫轉移酶活性在第四周時發(fā)生顯著性升高，提示GST作為解毒Ⅱ相酶催化的微囊藻毒素和GSH結合速率的增高，從而加快了機體對微囊藻毒素的清除。CAT活性在第三周和第四周下降，而SOD活性在第四周升高，表明微囊藻毒素處理后導致H2O2積累，使得氧化損傷加強。在本實驗中未發(fā)現(xiàn)小鼠肝臟脂質過氧化發(fā)生明顯變化。這一結果表明，微囊藻毒素處理小鼠后，小