三種花色苷與血清白蛋白相互作用的研究.pdf

1、花色苷是廣泛存在于植物中的一種很重要的水溶性色素，對(duì)人體的健康也很有益?；ㄉ漳负松系牧u基數(shù)目對(duì)其活性有很大的影響。本文采用多光譜手段，包括熒光光譜法、紫外-可見吸收光譜法及圓二色譜法，對(duì)三種自然界常見的花色苷（矢車菊素-3-O-葡萄糖苷、天竺葵素-3-O-葡萄糖苷和飛燕草素-3-O-葡萄糖苷）與人血清白蛋白之間的相互作用進(jìn)行了探究，以獲取二者結(jié)合情況的相關(guān)信息及B環(huán)羥基數(shù)目對(duì)花色苷與人血清白蛋白結(jié)合強(qiáng)度的影響。同時(shí)，采用多光譜手段及分

2、子對(duì)接技術(shù)研究了飛燕草素-3-O-葡萄糖苷與牛血清白蛋白之間的相互作用，并探討了不同pH值和常見金屬離子對(duì)二者結(jié)合強(qiáng)度的影響。此外，選用DPPH法對(duì)與人血清白蛋白結(jié)合前后三種花色苷抗氧化能力進(jìn)行了初步探討，為進(jìn)一步研究評(píng)價(jià)花色苷抗氧化能力提供理論依據(jù)。
　　本論文主要分為四部分，如下：
　　1.第一章綜述了花色苷的結(jié)構(gòu)與分類、生理功能、血清白蛋白的結(jié)構(gòu)與功能以及在花色苷與血清白蛋白相互作用的研究中常用的幾種光譜學(xué)手段。同時(shí)總

3、結(jié)了目前花色苷與蛋白質(zhì)相互作用的研究進(jìn)展。
　　2.第二章運(yùn)用熒光光譜、紫外光譜、圓二色譜等多光譜方法研究了在模擬生理?xiàng)l件下三種B環(huán)上不同羥基數(shù)目的花色苷，分別是天竺葵素-3-O-葡萄糖苷（P3G）、矢車菊素-3-O-葡萄糖苷（C3G）和飛燕草素-3-O-葡萄糖苷（D3G），與人血清白蛋白（HSA）之間的相互作用。研究結(jié)果表明，P3G、C3G和D3G能夠引起HSA內(nèi)源性熒光的猝滅。猝滅類型是靜態(tài)猝滅與非輻射能量轉(zhuǎn)移，與D3G的結(jié)合

4、中還包括動(dòng)態(tài)猝滅。P3G、C3G和D3G與HSA的結(jié)合距離r分別是2.83 nm、2.58 nm和2.34 nm。綜合表征參數(shù)YD3G>YC3G>YP3G，表明三種花色苷與HSA結(jié)合強(qiáng)度由大到小分別為：D3G>C3G>P3G。競(jìng)爭(zhēng)取代實(shí)驗(yàn)表明三種花色苷均結(jié)合在HSA的site I位點(diǎn)上。此外，三種花色苷都使HSA的二級(jí)結(jié)構(gòu)發(fā)生了變化。與P3G的結(jié)合使得HSA的α-螺旋含量增加，而C3G/D3G-HSA的α-螺旋含量降低?？傊瑢?shí)驗(yàn)結(jié)果表

5、明B環(huán)羥基數(shù)目對(duì)花色苷和HSA的相互作用發(fā)揮了重要的作用。
　　3.第三章采用多光譜方法和分子對(duì)接技術(shù)研究了在模擬生理?xiàng)l件下飛燕草素-3-O-葡萄糖苷（D3G）和牛血清白蛋白（BSA）之間的相互作用。研究結(jié)果表明D3G能夠引起B(yǎng)SA內(nèi)源性熒光的猝滅，猝滅類型是靜態(tài)猝滅。氫鍵和范德華力對(duì)D3G-BSA復(fù)合物的穩(wěn)定性發(fā)揮了重要作用。并探討了不同pH值和常見金屬離子對(duì)二者結(jié)合強(qiáng)度的影響。此外，實(shí)驗(yàn)結(jié)果還表明與D3G結(jié)合后BSA的二級(jí)結(jié)構(gòu)

6、發(fā)生了變化，α-螺旋含量降低。位點(diǎn)競(jìng)爭(zhēng)取代實(shí)驗(yàn)和分子對(duì)接均顯示D3G可以結(jié)合在BSA的site I位點(diǎn)上。
　　4.第四章利用DPPH法研究了與人血清白蛋白（HSA）結(jié)合對(duì)三種花色苷（P3G、C3G及D3G）抗氧化能力的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，三種花色苷都具有良好的抗氧化活性，且抗氧化能力隨著B環(huán)羥基數(shù)目的增加而增強(qiáng)。與HSA混合之后，三種花色苷的DPPH自由基清除率都明顯降低，這表明與HSA的相互作用降低了花色苷的抗氧化能力。而且與