核桃分心木水提液化學(xué)成分及抗腫瘤活性分析.pdf

1、分心木（Diaphragma juglandis Fructus)是胡桃科植物核桃果核內(nèi)的干燥木質(zhì)隔膜，也是一種傳統(tǒng)中藥材，《中藥大辭典》記載其主要用于治療腎虛、尿頻、痢疾等疾病，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明分心木具有抑菌、補(bǔ)腎、抗氧化、抗腫瘤等藥理功能。在日常生活中，人們常用來泡茶飲用。目前針對核桃分心木水提液化學(xué)成分及生理活性方面的研究鮮有報(bào)道。本文以核桃分心木水提液為研究對象，系統(tǒng)的研究了其易揮發(fā)性成分，建立了液質(zhì)聯(lián)用分析核桃分心木水提液化學(xué)

2、成分的新方法，同時(shí)評價(jià)了分心木水提物體外抗腫瘤活性，并對其誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制進(jìn)行了初步探索。主要研究內(nèi)容及結(jié)論如下：
　?。?）對核桃分心木水提液易揮發(fā)性成分進(jìn)行了分析
　　對核桃分心木水提液中易揮發(fā)性成分在4種不同萃取特性的固相微萃取頭上的富集條件進(jìn)行了選擇，并對其在2種色譜柱（HP-5和RTX-WAX）上的分離條件進(jìn)行了優(yōu)化，建立了頂空固相微萃?。℉S-SPME）和氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（GC-MS）的分析方法，并討論

3、了不同色譜柱和萃取頭對分析其易揮發(fā)性成分的影響。通過對4種萃取頭上的富集物經(jīng)2種色譜柱分離后的質(zhì)譜結(jié)果分析，確定結(jié)構(gòu)的化合物共115種，其中醇類化合物21種、酯類化合物18種、酮類化合物15種、芳香族化合物14種、烴類化合物13種、醛類化合物12種、酸類化合物6種、酚類化合物5種、醚類化合物2種、其他類型化合物9種。主要易揮發(fā)性成分是乙酸、乙酸乙酯、2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚、薄荷醇、雪松醇、2,3-丁二醇、1-己醇、苯乙醇、3-叔

4、丁基-4-羥基苯甲醚、己醛、甘菊藍(lán)。
　?。?）對核桃分心木水提液難揮發(fā)物進(jìn)行了液質(zhì)聯(lián)用分析
　　對核桃分心木水提液難揮發(fā)物的液相色譜分離條件進(jìn)行了選擇，利用液相色譜-串聯(lián)超高分辨率的精確質(zhì)量四級桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜(HPLC-Q-TOF-MS)對核桃分心木水提液中難揮發(fā)、高沸點(diǎn)以及熱穩(wěn)定性差的化學(xué)成分進(jìn)行了分析，建立了分心木化學(xué)成分分析的新方法。確定結(jié)構(gòu)的有：沒食子酸、兒茶素、槲皮苷、4-甲基傘形酮-β-D-葡萄糖苷和鞣花酸5

5、種化合物。其中：槲皮苷、4-甲基傘形酮-β-D-葡萄糖苷、鞣花酸均為首次報(bào)道；該分析方法操作簡單，靈敏度高，結(jié)果可靠。
　?。?）對分心木水提物體外抗腫瘤活性及分子機(jī)制進(jìn)行了初步探討
　　利用MTT法、流式細(xì)胞術(shù)評估了分心木水提物體外抑制HCT-116人直結(jié)腸癌細(xì)胞增殖的能力，結(jié)果表明：分心木水提物在濃度50~400μg/mL范圍內(nèi)，對癌細(xì)胞增殖抑制效果顯著，且該效果呈劑量依賴性，其IC50值為（208.78±4.22）μg