蒜氨酸降解產(chǎn)物的成分分析和抑菌機理研究.pdf

1、大蒜是一種重要的藥食兩用植物，具有多種生物活性，現(xiàn)代科學研究表明蒜氨酸及其類似物是大蒜生物活性功能因子的前體物質(zhì)。本文主要研究了蒜氨酸的酶解和堿熱降解產(chǎn)物的抑菌活性，探討了其抑菌機理，分析了化合物的組成和結(jié)構(gòu)，并研究了蒜氨酸降解產(chǎn)物抑菌活性的構(gòu)效關系，目的在于找出蒜氨酸降解產(chǎn)物中的功能因子，為蒜氨酸抑菌制品的開發(fā)提供理論和技術支持，為大蒜精深加工的開展做出貢獻。具體內(nèi)容如下:
　　在蒜氨酸降解產(chǎn)物的抑菌試驗中，蒜氨酸與蒜酶反應1m

2、in后加三氯乙酸終止，所得即酶降解產(chǎn)物;蒜氨酸的氫氧化鈉溶液放入高壓滅菌鍋中處理15min，即得堿熱處理產(chǎn)物。利用瓊脂擴散法表明，降解產(chǎn)物的抑菌活性隨蒜氨酸濃度增加而變大，蒜氨酸酶降解產(chǎn)物的抑菌活性優(yōu)于堿熱處理產(chǎn)物。酶降解產(chǎn)物對細菌、霉菌、放線菌均有較好的抑菌活性;堿熱處理產(chǎn)物對細菌比霉菌作用強烈，對放線菌無活性。二倍肉湯稀釋法測得酶降解產(chǎn)物對大腸桿菌(E.col)的最低抑菌濃度(MIC)為7.81μg·ml-1，堿熱產(chǎn)物的MIC為31

3、2.5μg·ml-1。
　　蒜氨酸降解產(chǎn)物抑菌機理研究，蒜氨酸酶降解產(chǎn)物和堿熱處理產(chǎn)物的E.col菌液電導率分別增加了11％和10％，紫外分光法測得大分子紫外吸收物質(zhì)也有所增加，表明降解產(chǎn)物可以改變E.col細胞膜的通透性，損害細胞膜的完整性;掃描電子顯微鏡觀察到菌體表面出現(xiàn)坍塌和孔洞，原生質(zhì)外漏;Hochest33342/PI雙染法判斷出降解產(chǎn)物可使細胞凋亡和壞死;考馬斯亮藍法測出菌體內(nèi)蛋白利用率下降了70％，表明降解產(chǎn)物抑制細

4、菌對蛋白質(zhì)的利用;菌體對菌液中磷的吸收結(jié)果看出降解產(chǎn)物阻礙了大腸桿菌對環(huán)境中磷的吸收，破壞細胞膜功能結(jié)構(gòu)，干擾核酸合成。
　　蒜氨酸降解產(chǎn)物成分分析方面，采用氣質(zhì)和液質(zhì)技術對降解產(chǎn)物進行分析。結(jié)果表明，酶降解產(chǎn)物中的二烯丙基二硫化物和二噻烯類物質(zhì)占80％以上;堿熱處理產(chǎn)物中的二烯丙基二硫醚類，占主成分40％左右，其余多為烷烴類、酯類、醇類等。利用半制備HPLC對蒜氨酸酶降解產(chǎn)物進行分離，并采用HPLC-MS-MS對其進行分析，確定