共振瑞利散射和高效液相色譜在藥物分析中的應(yīng)用研究.pdf

1、共振瑞利散射法(Resonance Rayleigh Scattering)是近年來發(fā)展起來的一項(xiàng)新的分析技術(shù)，具有靈敏度高、操作簡便等優(yōu)點(diǎn)引起了國內(nèi)外研究者的極大興趣，已經(jīng)成功用于生物大分子、痕量金屬、非金屬、表面活性劑以及有機(jī)物的研究和測定。 高效液相色譜(High Performance Liquid Chromatography，HPLC)是20世紀(jì)60年代末期在經(jīng)典液相色譜法和氣相色譜法的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的新型分離分析技

2、術(shù)。它采用了新型高壓輸液泵、高靈敏度檢測器和高效微粒同定相以及各種智能化軟件，從而比經(jīng)典液相色譜柱效高、分離能力高且速度快。目前，高效液相色譜法已經(jīng)廣泛應(yīng)用于食品、環(huán)境、醫(yī)藥等領(lǐng)域。 本文主要以共振瑞利散射光譜和高效液相色譜技術(shù)為手段，對有機(jī)物咖啡酸與鉛(Ⅱ)、銀(Ⅰ)—鄰菲羅林，兩種多糖(硫酸葡聚糖鈉、肝素鈉)與銀(Ⅰ)—鄰菲羅林的相互作用以及口腔炎噴霧劑中咖啡酸和綠原酸的分離測定進(jìn)行了研究，并應(yīng)用于樣品分析。主要研究內(nèi)容如下

3、： 1．鉛(Ⅱ)—咖啡酸螯合物共振瑞利散射和共振非線性散射光譜及其分析應(yīng)用。 在pH=6.80的二乙基巴比妥鈉—乙酸鈉—鹽酸緩沖溶液中，咖啡酸和鉛(Ⅱ)能夠形成螯合物，并引起反應(yīng)體系共振瑞利散射(RRS)、二級散射(SOS)和倍頻散射(FDS)顯著增強(qiáng)，其最大RRS波長位于470nm，另在320nm處有一小的散射峰，最大的SOS峰位于560nm，最大的FDS峰位于445nm。在各自的最大散射波長處，咖啡酸在2.0×10-

4、6mol·L-1～4.0×10-5mol·L-1范圍內(nèi)與△IRRS，△ISOS成正比，在5.0×10-7mol·L-1～1.5×10-5mol·-1范圍內(nèi)與△IFDS正比。該方法具有較高的靈敏度，對咖啡酸的檢出限為1.62×10-8mol·L-1(RRS)，7.90×10-8mol·L-1(SOS)，3.45×10～mol·L-1(FDS)。考察了適宜的反應(yīng)條件、影響因素和共存物質(zhì)的影響?；谏鲜鲅芯?，建立了一種靈敏、簡便、快速測定咖啡

5、酸的新方法。 2．銀(Ⅰ)—鄰菲羅啉體系共振瑞利散射測定咖啡酸 在pH=5.40的醋酸一醋酸鈉緩沖溶液中，銀(Ⅰ)與鄰菲羅啉形成配陽離子[AgPhen)2]+，進(jìn)而與咖啡酸(CA)結(jié)合形成離子締合物，使溶液的RRS強(qiáng)度顯著增強(qiáng)并產(chǎn)生相應(yīng)的散射光譜。其最大RRS波長位于386nm?？疾炝梭w系適宜的反應(yīng)條件和影響因素；在實(shí)驗(yàn)條件下，咖啡酸在2.0×10-7mol·L-1～1.0×10-4mol·L-1范圍內(nèi)與△IRRS成良好

6、的線性關(guān)系，對咖啡酸的檢出限為1.02×10-7mol·L-1該方法結(jié)果較好，簡便靈敏。 3．銀(Ⅰ)—鄰菲羅啉體系共振瑞利散射測定硫酸葡聚糖鈉。 在pH=3.40的醋酸—醋酸鈉沖溶液中，銀(Ⅰ)與鄰菲羅啉能夠形成配陽離子[Ag(Phen)2]+，再與硫酸葡聚糖鈉(DSS)結(jié)合形成離子締合物，使溶液的RRS強(qiáng)度顯著增強(qiáng)并產(chǎn)生相應(yīng)的散射光譜。其最大RRS波長位于400nm?？疾炝诉m宜的反應(yīng)條件和影響因素：在最佳實(shí)驗(yàn)條件下，

7、硫酸葡聚糖鈉的線性范圍為0.04～2.0μg·mL-1，線性回歸方程為△IRRS=22.707+996.398c，相關(guān)系數(shù)r為0.9993。該方法具有較高的靈敏度，對硫酸葡聚糖鈉的檢出限為2.8ng·mL-1。另外，考察了共存物質(zhì)的影響，測定了合成樣品中硫酸葡聚糖鈉的含量，效果令人滿意。 4．銀(Ⅰ)—鄰菲羅啉體系共振瑞利散射測定肝素鈉。 在pH=5.40的醋酸—醋酸鈉緩沖溶液中，銀(Ⅰ)與鄰菲羅啉形成配陽離子[Ag(P

8、hen)2]+，進(jìn)而與肝素鈉(Hep)結(jié)合形成離子締合物，引起反應(yīng)體系共振瑞利散射顯著增強(qiáng)，其最大RRS波長位于398nm。在最佳實(shí)驗(yàn)條件下，△IRRS=8.474+105.807c，相關(guān)系數(shù)r為0.9998，肝素鈉的線性范圍為0.04～6.0μg·mL-1，檢出限為20ng·mL-1。 5．RP—HPLC法測定康言靈口腔炎噴霧劑中綠原酸和咖啡酸的含量。 建立了反相高效液相色譜—紫外檢測器同時(shí)測定康言靈口腔炎噴霧劑中綠原

9、酸和咖啡酸的方法。采用島津Shim-PackVP—ODS柱(5μm，250mm×46mmid)，以甲醇-0.012mol·L-1的磷酸(27：73)為流動相，柱溫為30℃，流速為0.8mL，min-1，紫外檢測器波長為323nm。結(jié)果表明綠原酸在0.51～91.80μg·mL-1(r=0.9996)、咖啡酸在2.0～360.0μg·mL-1(r=0.9997)范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系，平均回收率(n=9)分別為97.5％和100.4％，