二苯烯酮類化合物的合成及其熒光性能研究.pdf

1、熒光探針具有高靈敏性、高選擇性、非破壞性、特異性和時(shí)間可控性等優(yōu)點(diǎn)，被廣泛應(yīng)用于分析化學(xué)、生物化學(xué)、細(xì)胞生物化學(xué)、醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域，特別是在生命科學(xué)領(lǐng)域。由于熒光探針技術(shù)在諸多領(lǐng)域中的重要應(yīng)用，尤其在蛋白質(zhì)基因工程中的應(yīng)用，使得其成為目前國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。
　　 在本文中，以無毒、藥效廣泛的可食用性色素姜黃素為母體化合物，設(shè)計(jì)合成了一系列共七十個(gè)化合物。這類化合物結(jié)構(gòu)中存在著二苯烯酮結(jié)構(gòu)，可作為熒光探針的“熒光團(tuán)”，而且烯酮結(jié)構(gòu)中存在

2、酮式與烯醇式之間的轉(zhuǎn)換亦可為化合物提供特殊的光學(xué)性能。
　　 由此，本文用熒光法研究了二苯烯酮類化合物與pH值、酪氨酸酶、BSA之間的熒光響應(yīng)。主要研究工作和結(jié)果如下：
　　 1二苯烯酮類化合物的合成
　　 本文選用常見的取代苯甲醛與酮為原料，在堿性條件下，以醛酮縮合機(jī)理，合成了七十個(gè)化合物。并用核磁共振、質(zhì)譜等對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行了表征。
　　 2二苯烯酮類化合物對(duì)pH值的響應(yīng)
　　 研究了合成的化合物

3、的紫外吸收光譜與熒光光譜對(duì)溶液pH值間的關(guān)系。結(jié)果顯示，化合物的紫外吸收光譜與熒光光譜對(duì)pH值有強(qiáng)烈的依賴性。紫外吸收光譜在溶液酸堿性發(fā)生變化時(shí)，最大吸收峰發(fā)生紅移，使得溶液顏色產(chǎn)生明顯變化。同時(shí)，熒光光譜強(qiáng)度隨著。pH值的增加發(fā)生顯著性增大。上述特性表明二苯烯酮類化合物可作為可視化pH熒光探針使用。其中3'-OCH3-4'-OH結(jié)構(gòu)的類似物(A4、B4、C4、D4和E4)具有良好熒光性能。
　　 構(gòu)效關(guān)系研究表明：4'-OH是

4、化合物熒光性能的主要基團(tuán)。在酚羥基鄰位引入甲氧基能提高化合物的熒光性能，而引入溴則降低其熒光性能。此外，環(huán)戊酮類化合物相對(duì)于丙酮、環(huán)己酮、噻喃酮和吡喃酮類化合物具有較高的熒光性能。
　　 3二苯烯酮類化合物對(duì)酪氨酸酶的響應(yīng)
　　 研究了酪氨酸酶對(duì)化合物熒光的猝滅。同時(shí)，發(fā)現(xiàn)化合物對(duì)酪氨酸酶有抑制作用。結(jié)果表明，酪氨酸酶對(duì)化合物的熒光具有猝滅功能。隨著酪氨酸酶濃度的增加，化合物的熒光強(qiáng)度逐漸被猝滅，其中以含有鄰二酚羥基結(jié)構(gòu)

5、的類似物猝滅性能最好。另一方面研究顯示，化合物特別是帶有酚羥基的二苯烯酮類似物對(duì)酪氨酸酶有顯著的抑制作用。隨著化合物濃度的增加，酪氨酸酶的活性逐漸降低，以含有鄰二酚羥基結(jié)構(gòu)的類似物(A6、B6、C6、D6和E6)抑制效果明顯。最終分析表明酶動(dòng)力學(xué)法和熒光光譜法所得結(jié)果可以相互驗(yàn)證。
　　 4二苯烯酮類化合物對(duì)BSA熒光的響應(yīng)
　　 研究了合成化合物對(duì)BSA熒光的猝滅作用。結(jié)果顯示，化合物對(duì)BSA熒光的有猝滅效果。其中，含