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文檔簡(jiǎn)介
1、本研究是從土壤中分離篩選得到菌株D和菌株S，研究表明，混合發(fā)酵培養(yǎng)其產(chǎn)酶的能力顯著的提高，其產(chǎn)酶最適培養(yǎng)基組分為(％，w/v)：尿素1.0，K2HPO4 0.07，KH2PO4 0.03，MgSO4 0.05，酵母粉0.5，甲殼素1.0。搖瓶發(fā)酵條件：pH5.5，2％(v/v)接種量，32℃，130rpm培養(yǎng)72h，500mL錐形瓶培養(yǎng)基裝量為100mL。在最適產(chǎn)酶發(fā)酵條件下，甲殼素酶活力可達(dá)到 1.19 U/mL。采用40％-80％(
2、NH4)2SO4分級(jí)鹽析、透析脫鹽、甲殼素親和層析、Sephadex G-75凝膠過(guò)濾等分離純化技術(shù)，獲得了純化的甲殼素酶。制品經(jīng)過(guò)SDS-PAGE電泳，該甲殼素酶呈單一條帶，分子量約為45kD。對(duì)該酶進(jìn)行部分酶學(xué)性質(zhì)的研究表明：該甲殼素酶的最適作用溫度為60℃，最適反應(yīng)pH為pH5.0；最適反應(yīng)底物為粉末甲殼素；金屬離子Fe2+，Mn2+對(duì)酶活力有明顯的促進(jìn)作用，Cu2+、Zn2+則對(duì)酶活力具有明顯的抑制作用；該酶除能降解甲殼素，對(duì)殼
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