基于氨基酸氧化酶的α-氨基酸的手性拆分.pdf

1、α-氨基酸對(duì)于生命過程研究和生物醫(yī)藥開發(fā)有重要意義。α-氨基酸是蛋白質(zhì)的主要組分，是生物體中最重要的氨基酸，而所有人體內(nèi)組成蛋白質(zhì)的氨基酸則都是α-氨基酸。自然界存在的20種氨基酸中，除甘氨酸外，α-氨基酸都是手性的，它們各自發(fā)揮著其獨(dú)特的功能，與人們的生存、生命息息相關(guān)。然而，天然氨基酸數(shù)目有限，非天然氨基酸則多為外消旋體，且D-型和L-型對(duì)映體的生理作用迥異。
　　本文通過生物催化的方法對(duì)外消旋的α-氨基酸進(jìn)行手性拆分。生物催

2、化中常用的有機(jī)體主要是微生物，其本質(zhì)是利用微生物細(xì)胞內(nèi)的酶進(jìn)行催化，促進(jìn)生物轉(zhuǎn)化的進(jìn)程。酶催化的反應(yīng)對(duì)底物具有高度立體專一的特性，這種性質(zhì)可用于使外消旋體中的某一異構(gòu)體參加酶促反應(yīng)，被消耗為另一物質(zhì)，而另一異構(gòu)體不受影響，但性質(zhì)與消耗后形成的物質(zhì)明顯不同，使利用一般物理分離方法將兩個(gè)對(duì)映體的拆分變?yōu)榭赡堋?br>　　本文實(shí)驗(yàn)過程主要分為三個(gè)方面:
　　1.通過對(duì)微生物的篩選確定各類微生物對(duì)α-氨基酸的手性選擇:選取DL-Met為反

3、應(yīng)底物，通過對(duì)多種微生物菌株的篩選，進(jìn)行D-Met和L-Met的拆分，從中篩選出具有高選擇性和高效率的菌株。
　　2.選取纖細(xì)酵母菌(Rhodotorula graminis，R.g.)作為反應(yīng)菌株，并對(duì)R.g.提供的LMO進(jìn)行底物特異性和反應(yīng)機(jī)理等進(jìn)行研究。
　　3.選取氣單胞(Aeromonas sp.)和破壁后的HP0203菌（hpDAAO）作為反應(yīng)菌株，提供D-氨基酸氧化酶(DAAO)，分別對(duì)其底物的特異性，反應(yīng)機(jī)理