新型熒光探針的合成及其與生物大分子作用的研究.pdf

1、近年來,熒光光譜法因其具有操作簡便、靈敏度高等優(yōu)點,逐漸發(fā)展成為一種十分重要且有效的光譜分析手段,相應地,設計合成不同類型的熒光試劑也成為這一領域工作者的重要任務之一。針對所要識別的客體,將具有選擇性識別功能的基團修飾在熒光基團上,合成具有選擇性識別功能的熒光分子,根據(jù)熒光分子與客體作用后熒光信號的變化,即可實現(xiàn)對客體的識別及傳感。本文設計合成了三種有機小分子化合物,利用光譜法研究了其自身或金屬配合物與生物大分子DNA或BSA的作用,共

2、分四個章節(jié)進行闡述。
　　 第一章為文獻綜述,對2005年以來國內(nèi)外報道的有關熒光光譜法研究某些小分子熒光探針與DNA和蛋白質相互作用的研究作了簡要概述。
　　 第二章合成了新的席夫堿類化合物N'-(2-羥基萘亞甲基)-4-(2-羥基萘亞甲基氨基)苯甲酰肼(HHBH,1),產(chǎn)物經(jīng)1H NMR、質譜和IR光譜鑒定。采用熒光光譜法和UV-Vis吸收光譜法研究了1的鋅配合物1-Zn與BSA的相互作用。在pH7.4 Tris-H

3、Cl緩沖溶液中,以370 nm激發(fā),該配合物1-Zn在475 nm處有弱熒光發(fā)射,加入BSA后熒光顯著增強。同時1-Zn配合物能猝滅BSA的內(nèi)源熒光,考察了不同溫度下Stern-Volmer猝滅方程以及BSA對主體吸收光譜的影響,結果表明此過程為形成基態(tài)配合物的靜態(tài)猝滅過程,并計算出不同溫度下的結合常數(shù)Kb和結合位點數(shù)n,結果顯示Kb幾乎不隨溫度的變化而變化,n值接近1。同步熒光和三維熒光光譜表明1.Zn配合物與BSA作用時引起了BSA

4、構象的變化。依據(jù)FSrter非輻射能量轉移理論,確定了1-Zn配合物與BSA間的結合距離和能量轉移效率。
　　 第三章合成了新的席夫堿類化合物對氨基苯乙酮-對二甲氨基苯甲酰腙(AADBH,2),產(chǎn)物經(jīng)1H NMR鑒定。采用熒光光譜法和UV-Vis吸收光譜法研究了2與DNA的相互作用。在pH7.4 Tris-HCl緩沖溶液中,以345 nm激發(fā),該化合物熒光很弱,加入DNA后450 nm處熒光逐漸增強。離子強度對2-DNA熒光強度

5、幾乎沒有影響,這說明2和DNA間不存在靜電作用。DNA對2吸收光譜的影響呈現(xiàn)減色效應,2與熱變性DNA的研究和2對EB-DNA體系的猝滅作用研究結果均表明2主要以插入作用方式與DNA作用。
　　 第四章采用熒光光譜法和UV-Vis吸收光譜法研究了新化合物2-[2-(3,5-二(2-吡啶基甲基)氨甲基-4-羥基苯基)乙烯基]-5-甲基吡嗪(biPAHEMP,3)的鋅配合物3-Zn與DNA的作用,在’pH7.4 Tris-HCl緩沖