蛋白質(zhì)固定和分離載體的制備與性能研究.pdf

1、在過去的數(shù)十年里，蛋白質(zhì)的固定和分離技術(shù)引起了人們廣泛的關(guān)注，也取得了一定的進(jìn)展。由于蛋白質(zhì)成分的復(fù)雜性，空間結(jié)構(gòu)的多元化及其靈活多變性，導(dǎo)致蛋白質(zhì)在固定和分離過程中存在著巨大的挑戰(zhàn)性。蛋白質(zhì)固定和分離途徑在宏觀上可分為物理方法和化學(xué)方法兩種。如何選擇和設(shè)計出一種切實可行的方法來固定和分離蛋白成為了蛋白質(zhì)固定和分離工程中最艱巨的任務(wù)。 在蛋白質(zhì)固定的載體制備方面，本文選用聚氨酯(PU)表面為基材，首先對PU表面進(jìn)行逐步的改性，使

2、其表面接枝上8-羥基喹啉(HQ)作為配體，最后通過金屬離子與表面配體的配位作用，使金屬離子以螯合物的形式固定在聚氨酯(PU)的表面，形成了蛋白質(zhì)固定的基體表面。本實驗包括在改性后的Pu表面接枝親水層PEG鏈段作為“間隔臂”，從而提高PU表面抗非特異性蛋白吸附的能力，接枝HQ為金屬離子能在其表面固定形成不飽和絡(luò)合物提供配體。X射線光電子能譜(XPS)對PU表面的化學(xué)成分進(jìn)行分析的結(jié)果表明，PEG、HQ已經(jīng)成功接枝到PU表面，金屬離子與HQ

3、之間形成了理想的絡(luò)合物。通過蛋白吸附實驗對改性后的PU表面蛋白吸附能力進(jìn)行了測試，實驗結(jié)果表明，Ni2+配位的PU表面比其他金屬離子配位的PU表面具有更好的蛋白吸附能力，Ni2+配位后的表面相對于原始PU表面以及PEG接枝的表面來說，其表面對蛋白質(zhì)的吸附能力分別提高到了2.14倍和20.4倍。蛋白質(zhì)活性測試結(jié)果表明，Ni2+配位后形成的不飽和絡(luò)合物表面不僅能夠高密度穩(wěn)定的固定蛋白，而且能較好的保持其表面蛋白質(zhì)的生物活性。 在蛋白