城市農(nóng)貿(mào)市場空氣微生物群落特征及抗生素抗性基因污染.pdf

1、城市農(nóng)貿(mào)市場活禽區(qū)屬為數(shù)不多的的人畜交叉感染區(qū)域，活禽肌體和糞便常攜帶大量病原菌和抗生素抗性基因，通過空氣傳播可能會進(jìn)入人體呼吸系統(tǒng)引起市場內(nèi)及周邊居民致病，存在較大的健康風(fēng)險。目前，對農(nóng)貿(mào)市場空氣微生物群落特征和抗生素抗性基因污染情況還不清楚，研究農(nóng)貿(mào)市場環(huán)境群落特征和抗生素抗性基因污染程度，是控制農(nóng)貿(mào)市場污染風(fēng)險的前提。
　　本研究以城市典型社區(qū)級農(nóng)貿(mào)市場為研究對象，用基于培養(yǎng)采樣方式，快速檢測評價農(nóng)貿(mào)市場氣溶膠細(xì)菌濃度和粒徑

2、分布；基于不同細(xì)菌濃度環(huán)境，建立一套滿足空氣微生物群落特征和抗生素抗性基因定性定量需求的氣溶膠采樣方法。研究通過高通量測序分析農(nóng)貿(mào)市場氣溶膠微生物群落結(jié)構(gòu)、病原菌分布與來源，并用qPCR技術(shù)分析農(nóng)貿(mào)市場不同介質(zhì)進(jìn)行抗生素抗性基因污染特征。
　　研究表明，農(nóng)貿(mào)市場細(xì)菌污染嚴(yán)重。市場內(nèi)細(xì)菌濃度高于室外2個數(shù)量級，其中農(nóng)貿(mào)市場活禽區(qū)污染最為嚴(yán)重，高達(dá)105 CFU/m3，采樣點隨著距離活禽區(qū)越遠(yuǎn)，細(xì)菌氣溶膠濃度越低，農(nóng)貿(mào)市場內(nèi)部一般區(qū)域

3、嚴(yán)重污染，各處PM2.5占44.2％以上，市場門口10 m處輕微污染，距市場100 m以上清潔。
　　基于環(huán)境細(xì)菌濃度，本研究使用大流量TSP采樣器（流量1.05 m3/min），建立了滿足空氣微生物多樣性和抗生素抗性基因分析需求的微生物氣溶膠取樣方法。氣溶膠收集到采樣膜上后，經(jīng)前處理和試劑盒提取，能科學(xué)、高效的回收空氣微生物 DNA信息，滿足后續(xù)分析需求。同時，提出了一套空氣抗生素抗性基因（Antibiotic Resistan

4、ce Genes，ARGs）絕對定量方法。
　　農(nóng)貿(mào)市場氣溶膠微生物中主要細(xì)菌類群為變形菌門（平均30.72%）、擬桿菌門（平均13.49%）、厚壁菌門（平均11.50%）、和放線菌門（平均9.16%）、藍(lán)藻門（平均13.37%）、棲熱菌（平均11.87%）。活禽區(qū)氣溶膠樣品菌群結(jié)構(gòu)與活禽區(qū)糞便菌群結(jié)構(gòu)相近，活禽區(qū)氣溶膠主導(dǎo)病原菌為棒狀桿菌、大腸桿菌、表皮葡萄球菌和糞腸球菌，病原菌主要來源于活禽糞便，病原菌的數(shù)量隨著與活禽區(qū)距離增

5、加呈現(xiàn)明顯的降低現(xiàn)象。
　　農(nóng)貿(mào)市場不同介質(zhì)抗生素抗性基因污染嚴(yán)重。氣溶膠樣品與農(nóng)貿(mào)市場內(nèi)部糞便、地面塵土、沖洗水、水產(chǎn)養(yǎng)殖水tetC、tetG、sul2、ermC檢出率均在90%以上，農(nóng)貿(mào)市場不同介質(zhì)樣品中四種抗性基因含量tetG>sul2>ermC>tetC。農(nóng)貿(mào)市場及周邊環(huán)境氣溶膠抗生素抗性基因含量受活禽區(qū)氣溶膠影響較為明顯，活禽區(qū)最高，隨距離越遠(yuǎn)呈依次遞減趨勢。
　　農(nóng)貿(mào)市場活禽區(qū)是一個病原菌和抗性基因儲存庫。控制農(nóng)