圍生期雙酚A暴露對(duì)子代小鼠行為及腦內(nèi)NMDA受體表達(dá)的影響.pdf

1、環(huán)境內(nèi)分泌干擾物可以模擬天然激素的作用，擾亂內(nèi)分泌系統(tǒng)的正常功能，包括激素的合成、分泌、轉(zhuǎn)運(yùn)、結(jié)合、生物效應(yīng)及清除，影響性激素敏感組織的發(fā)育和長期功能，特別是在組織形成和發(fā)育階段(如在妊娠期和新生兒期)的暴露，對(duì)人類健康及野生動(dòng)物造成極大的威脅。雙酚A(Bisphenol A，BPA)是酚類化合物中具有代表性的環(huán)境內(nèi)分泌干擾物，廣泛用于生產(chǎn)碳酸聚酯、環(huán)氧樹脂、聚苯乙烯樹脂以及殺真菌劑、抗氧化劑、染料、食品包裝材料等，并不斷開發(fā)新的用途。

2、BPA能夠從塑料制品中擴(kuò)散出來引起環(huán)境和食物的污染，例如裝食品的罐頭，嬰兒瓶，餐具以及白色的牙科填充物和密封劑。隨著塑料制品的廣泛應(yīng)用，BPA造成了嚴(yán)重的環(huán)境污染。內(nèi)源性雌激素可以影響動(dòng)物的自發(fā)活動(dòng)和探究、焦慮、學(xué)習(xí)記憶等神經(jīng)行為。BPA兼有雌激素和抗雄激素樣活性，圍生期母體BPA暴露可影響雄性子代大鼠大腦皮層的結(jié)構(gòu)，以及大腦皮層和海馬神經(jīng)元的形態(tài)發(fā)育，說明發(fā)育中的腦是對(duì)BPA敏感的靶器官。但有關(guān)BPA對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)和非生殖性行為影響的

3、研究較少。NMDA型谷氨酸受體是所有興奮性突觸的突觸后必需組份，參與了誘導(dǎo)長時(shí)程增強(qiáng)作用以及學(xué)習(xí)記憶行為、調(diào)節(jié)神經(jīng)元的存活和遷移、控制著發(fā)育過程大腦神經(jīng)元回路的結(jié)構(gòu)和樹突和軸突結(jié)構(gòu)發(fā)育、突觸的可塑性等許多復(fù)雜的生理過程。因此，本研究探討了母體BPA暴露對(duì)子代小鼠學(xué)習(xí)記憶等非生殖行為的影響，并進(jìn)一步分析其與NMDA受體蛋白表達(dá)關(guān)系。 本研究通過母鼠從妊娠第7天至斷乳期(產(chǎn)后21天)進(jìn)行雙酚A(Bisphenol A，BPA，0.0

4、5、0.5、5、50 mg/kg/d)灌胃染毒，同時(shí)設(shè)對(duì)照組。綜合應(yīng)用曠場行為、高架十字迷宮、水迷宮和跳臺(tái)等行為學(xué)檢測方法，結(jié)合Western Blot技術(shù)，從整體和分子水平研究了BPA暴露對(duì)子代小鼠神經(jīng)行為和谷氨酸NMDA受體表達(dá)的影響。 首先觀察了母鼠BPA暴露后對(duì)出生后21天和56天不同性別子代小鼠行為的影響。每個(gè)劑量組雌雄子代小鼠分別在PND21和PND56進(jìn)行各項(xiàng)行為測試。以曠場行為檢測小鼠的自發(fā)活動(dòng)及探究行為，以高架

5、十字迷宮檢測小鼠的焦慮程度，以水迷宮檢測小鼠的空間學(xué)習(xí)記憶能力，以跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)檢測小鼠的被動(dòng)回避記憶行為。結(jié)果表明：圍生期BPA暴露顯著抑制子代小鼠的體重增長，并使體重表現(xiàn)出顯著的性別差異(P<0.001)：BPA使PND21雌雄小鼠和PND56雄性子鼠自發(fā)活動(dòng)能力減弱(P<0.05或P<0.01)，理毛和站立行為發(fā)生性別分化(P<0.05或P<0.01)：BPA顯著增加PND21雌雄仔鼠和PND56雌性仔鼠在高架十字迷宮中進(jìn)入開放臂次數(shù)和

6、停留時(shí)間(P<0.05或P<0.01)并減少封閉臂的進(jìn)入時(shí)間，減少PND56雄鼠開放臂的進(jìn)入并增加其封閉臂的進(jìn)入，干擾了發(fā)育期和成年期小鼠焦慮行為的性別分化；BPA使PND21和PND56雄性子鼠在水迷宮搜索平臺(tái)平均距離延長(P<0.05或P<0.01)，但對(duì)雌性小鼠空間學(xué)習(xí)記憶行為沒有影響；BPA使PND21和PND56雄性子鼠在跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)中的錯(cuò)誤次數(shù)增加而跳下平臺(tái)潛伏期縮短，PND56雌性仔鼠的被動(dòng)回避記憶僅被高劑量BPA減弱。

7、 為了探討小鼠非生殖性行為變化與腦內(nèi)NMDA受體的表達(dá)的關(guān)聯(lián)性，在子代小鼠PND21和PND56時(shí)斷頭取腦，用Western Blot技術(shù)對(duì)不同性別小鼠大腦皮層和海馬的NMDA受體的蛋白表達(dá)進(jìn)行了研究，實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)BPA暴露不同程度的降低了子代雌雄小鼠的大腦皮層和海馬內(nèi)NMDA各個(gè)亞基的蛋白表達(dá)量(P<0.05或P<0.01)：0.5～50mg/kg/d的BPA對(duì)出生后21天和56天的雌雄小鼠各NMDAR亞基表達(dá)量影響顯著(P<0.0